血清HGF activatorの測定系の確立とその臨床的意義

血清HGF激活剂测定体系的建立及其临床意义

• 批准号: 08770368
• 负责人: 堀 剛
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770368/
• 关键词: HGF activator; HGF; 劇症肝炎; ELISA; 肝再生

Hepatocyte Growth Factor(HGF)の非活性型から活性型へのプロセシングを触媒するHGF activatorの免疫酵素測定法(ELISA)を確立することを目的とした。ELISA測定系は、マウスモノクローナル抗HGFactivator抗体をプレートに固相化し、サンプルを添加した後、2次抗体にHRP標識マウスモノクローナル抗HGF activator抗体を用い、OPD発色後、波長490nmにて吸光度を測定した。まず、0.625ng/mlから100ng/mlまでの精製HGFactivator標品を用いて標準曲線を作成したところHGFactivator蛋白濃度として1ng/mlより40ng/mlの間で良好な標準曲線がえられた。つぎにこのHGFactivatorELISA系を用いて急性肝障害患者の血漿HGF activator濃度を測定した。正常者血漿HGFactivator蛋白濃度は1〜5ng/mlであったが、血清HGFレベルが3.36ng/ml、2.59ng/mlと上昇している劇症肝炎患者血漿のHGFactivator蛋白濃度はそれぞれ16.0ng/ml、29.2ng/mlとあきらかに上昇していた。また正常サルの臓器におけるHGF activator蛋白レベルは、脾臓、腎臓ではほとんど検出されないが、肝臓におけるそのレベルは著しく高かった。四塩化炭素を経口投与して作製した急性肝障害サルでは、肝臓におけるHGF activator蛋白レベルはやや増加した。我々が確立したHGFactivator ELISA測定系は臨床的にも応用可能と思われ、さらには各種肝疾患患者における肝再生の病態解析に有用であると考えられる。

The aim of this study was to establish an immunoenzyme assay for Hepatocyte Growth Factor(HGF). ELISA assay was performed after immobilization of anti-HGF activator antibody, addition of anti-HGF activator antibody, secondary antibody HRP labeling, and OPD development, and absorbance measurement at 490nm. The standard curve for refined HGFactor standard was prepared from 0.625 ng/ml to 100ng/ml, and the standard curve for HGFactor protein concentration was prepared from 1ng/ml to 40ng/ml. The HGF Activator ELISA is used to determine plasma HGF activator concentrations in patients with acute liver disease. The plasma HGFactor protein concentration of normal subjects was 1 ~ 5ng/ml, while that of serum HGF increased from 3.36 ng/ml to 2.59 ng/ml. The plasma HGFactor protein concentration of severe hepatitis patients was 16.0 ng/ml to 29.2 ng/ml. The HGF activator protein in the normal organs of the spleen, kidney and kidney is higher than that in the normal organs of the liver. The HGF activator protein level in liver tissue was increased after the treatment of acute liver injury. We have established that the HGFactor ELISA assay is clinically useful in the analysis of liver regeneration in patients with various liver diseases.