3'-Me-DAB誘発肝癌実験系における悪性腫瘍とユビキチン動態との関連

3-Me-DAB诱导肝癌实验体系中恶性肿瘤与泛素动力学的关系

• 批准号: 08770396
• 负责人: 阿部 俊夫
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770396/
• 关键词: ユビキチン; マルチユビキチン鎖; 肝臓癌; イムノアッセイ

ユビキチンは、選択的細胞内蛋白分解を誘起する因子である。すなわち、“遊離型ユビキチン"が酵素群の作用で標的蛋白質に結合し、“マルチユビキチン鎖"を形成することで26Sプロテアソームによる標的蛋白質の分解を惹起する。本研究は、ラット肝癌におけるユビキチン動態の解析を目的として行った。ラットを0.06%3'-methyl-diaminobenzidine(3'-Me-DAB)含有固形試料を用いて140日間飼育し、肝臓癌を誘発した。この肝臓の癌部と非癌部及び正常ラット肝臓の各々から、トリス緩衝液に可溶な易様性画分と同緩衝液に不溶で8M尿素で可溶化される難溶性画分を調製した。各画分の単位蛋白あたりの“遊離型ユビキチン"と“マルチユビキチン鎖"を2種類の特異的イムノアッセイで定量し、以下のような知見を得た。1.すべての組織において、殆どの遊離型ユビキチンは易溶性画分にのみ認められた。一方、マルチユビキチン鎖は、易溶性および難溶性の両画分に見出された。2.癌部の遊離型ユビキチン量は、非癌部および正常の肝臓と比較し、有意に多かった。3.癌部の易溶性マルチユビキチン鎖量は、非癌部および正常肝臓よりも有意に多かった。4.癌部の難溶性マルチユビキチン鎖量は、非癌部および正常肝臓よりも多い傾向を示した。また、同様の肝癌ラットの血清マルチユビキチン鎖濃度は、正常ラットよりも有意に高値を示した。以上の結果から、肝癌ではユビキチン全体量が増加し、それが血清マルチユビキチン鎖濃度に反映されることが示唆された。今回の結果がユビキチン依存性蛋白分解の亢進を意味するのか、また、標的蛋白質は何かといった問題が、肝癌におけるユビキチン系の意義を解明する上で重要な今後の課題である。

泛素是诱导选择性细胞内蛋白水解的因素。也就是说，“游离泛素”通过酶基团的作用与靶蛋白结合，并形成“多必蛋白链”，从而导致26S蛋白酶体降解靶蛋白。进行这项研究的目的是分析大鼠肝癌中的泛素动力学。在含有0.06％3'-甲基二氨基苯胺（3'-me-dab）的固体样品上饲养大鼠140天以诱导肝癌。从肝脏的癌性，非癌性部分和正常大鼠肝脏中，制备了易于溶解性的Tris缓冲液的易溶分数，并在8M尿素中溶解了较差的可溶性分数。使用两个特定的免疫测定法对每个馏分中每单位蛋白的“游离泛素”和“多泛素链”进行了定量，并获得了以下发现。 1。在所有组织中，大多数游离的泛素仅在易于溶解的部分中发现。另一方面，在易于溶解和可溶性的部分中都发现了多泛素链。 2。癌区域中游离泛素的量显着高于非癌性区域和正常肝脏。 3。癌区域中易于溶剂多泛素链的量显着高于非癌区和正常肝脏的量。 4。癌区域中可溶性多泛素链的量往往高于非癌性区域和正常肝脏的量。另外，在相似的肝癌大鼠中的血清多必蛋白链浓度明显高于正常大鼠的血清链浓度。上述结果表明，肝癌的泛素总量增加，这反映在血清多必蛋白链浓度中。诸如当前结果是否意味着增加泛素依赖性蛋白水解以及目标蛋白是什么是阐明泛素系统在肝癌中的重要性方面的重要挑战。