基底膜部コンドロイチン硫酸プロテオグリカンの産生細胞とその産生調節機序の研究

基底膜硫酸软骨素蛋白多糖产生细胞及其产生调控机制的研究

• 批准号: 08770676
• 负责人: 山根 康弘
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770676/
• 关键词: プロテオグリカン; コンドロイチン; 基底膜; 表皮細胞

1.培養表皮細胞による基底膜部コンドロイチン硫酸プロテオグリカン(BM-CSPG)のin vitroでの産生に関して以下の実験結果が得られた。A)培養表皮細胞はin vitroでBM-CSPGのmRNAを発現している。これは培養表皮細胞より抽出したtotal RNAだけでなく、purifyされたmRNAを用いたnorthern blot法でも証明された。B)BM-CSPG mRNAの発現は細胞をTGF-β(β_1〜β_3),TNF-αなどのcytokineで処理しても質・量のどちらにおいても変化がなかった。C)培養表皮細胞のcell extroct及び培養上清を用いてimmunoblot法およりimmunoprecipitotion法でタンパクlevelでのBM-CSPG産生を検索したが、どちらの方法でも培養表皮細胞によるBM-CSPG産生は同定できなかった。D)基底膜部ヘパラン硫酸プロテオグリカンであるperlecanの培養表皮細胞による産生はタンパクlevelで同定でき、TGF-β_1によりup-regulateされることが証明された。これは、BM-CSPGとperlecanは異なるメカニズムでその産生がコントロールされていることを示唆し興味深い。2.培養表皮細胞および正常ラット皮膚についてin situ hybridization法でBM-CSPG mRNAの発現を調べたが、いずれの場合にもBM-CSPG mRNAの発現は同定されなかった。3.nude rat(ヌードラット)に培養ヒト有棘細胞癌細胞を皮内注射し、腫瘍塊を作り、その腫瘍細胞塊周囲基底膜部におけるBM-CSPGの存在を抗ラットBM-CSPG抗体を用いた蛍光抗体法で調べた。BM-CSPGは腫瘍細胞周囲基底膜部に線状に局在していた。我々が用いた抗BM-CSPG抗体はラット特異的でヒトの皮膚は全く染色されないのでこの実験系で腫瘍細胞周囲に認められたBM-CSPGはラット真皮由来と考えられる。このことはin vivoでは、表皮細胞だけでなく(J Invest Permatol,106,531-537,1996),真皮成分もBM-CSPGを産生しうることを示している。

1. The following results were obtained for the production of BM-CSPG in vitro in cultured epidermal cells. A) The expression of BM-CSPG mRNA in cultured epidermal cells was not detected in vitro. Total RNA was extracted from cultured epidermal cells and purified by northern blot. B) The expression of BM-CSPG mRNA is related to TGF-β(β_1 ~ β_3),TNF-α and cytokine production. C) The production of BM-CSPG in cultured epidermal cells was detected by immunoblot method and culture supernatant method. D) Basal membrane part: Perlecan production in cultured epidermal cells at the same level as TGF-β_1 up-regulate. The BM-CSPG is a perlecan. 2. The expression of BM-CSPG mRNA in cultured epidermal cells was regulated by situ hybridization in normal skin. 3. The presence of BM-CSPG in the basement membrane of cultured tumor cells was modulated by anti-BM-CSPG antibody using a light antibody assay. BM-CSPG has a linear structure around the basement membrane of tumor cells. The anti-BM-CSPG antibody was used to detect the origin of BM-CSPG in the dermis. The dermal component BM-CSPG is produced in vivo by epidermal cells (J Invest Permatol,106,531- 537, 1996).

项目成果

Yasuhiro Yamane et al.: "Basement Membrane Proteoglycans Are of Epithelial Origin in Rodent skin" J.Invest Dermatol. 106. 531-537 (1996)

Yasuhiro Yamane 等人：“啮齿动物皮肤中的基底膜蛋白聚糖是上皮来源”J.Invest Dermatol。

Y.Yamane et al.: "Linear IgA bullous dermatosis od childhood : identification of the target antigens and study of cellular sources" Br J Dermatol. 135. 785-790 (1996)

Y.Yamane 等人：“儿童期线性 IgA 大疱性皮肤病：目标抗原的鉴定和细胞来源的研究”Br J Dermatol。

Yasuhiro Yamane et al.: "Plalelets sythesize an 85k of Molecule which is Recognized by IgG from Potients with Bullous Pemphigoid." Acta Dermatologica (Kyoto). 91. 517-521 (1996)

Yasuhiro Yamane 等人：“血小板合成了 85k 的分子，该分子可被大疱性类天疱疮患者的 IgG 识别。”