甲状腺ホルモン受容体C末端側転写活性ドメインの機能解析

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機能的なT_3受容体(TR)にはα1とβ1がある。我々は、TRα1とβ1のC端にある転写活性ドメインの機能の差を調べるため、全身型甲状腺ホルモン不応症で発見されたC端11個のアミノ酸を欠失する異常TRβ1(βF451X)と、これと全く同一のC端欠失を持つよう作成した異常TRα1(αF397X)を用い、種々のTR応答領域(TRE)における両者の機能の差を比較検討した。1,consensus TREであるpalindrome(Pal)、direct repeat(DR4)やnative TREであるmalic enzyme(ME)、myosin heavy chain α(MHCα)、lysozyme silencer(F2)における正常TRα1、TRβ1に対するドミナントネガテイブ作用を比較した。ドミナントネガテイブ作用はTRE依存性で、Pal、DR4、F2においてはβF451Xの方がαF397Xよりも有意に強いドミナントネガテイブ作用を示したが、MHCα、MEでは両者に差を認めなかった。正常TRに対する選択性はなく、βF451XがTRβ1を、αF397XがTRα1をより強く阻害するといったことはなかった。2,DR4においてパートナー蛋白であるレチノイドX受容体(RXR)を同時発現させた場合、αF397Xのドミナントネガテイブ作用は増強したがβF451Xのそれは変化しなかった。3,T_3非存在時、DR4とPalにおいてαF397XもβF451Xと同様に基礎転写活性を抑制した。4,酵母の転写因子GAL4のDNA結合ドメインとRXRの融合蛋白に対する親和性は、αF397Xの方がβF451Xよりも有意に強かった。以上より、αF397XもβF451Xと同様に5種のTREで強いドミナントネガテイブ作用を示すこと、ドミナントネガテイブ効果はTRE依存性で、ある種のTREではβF451Xの方がαF397Xよりも強いドミナントネガテイブ作用を発揮すること、RXRとの親和性や充分量のRXR存在下でのドミナントネガテイブ作用に両者で差があることが明らかとなった。αF397Xも甲状腺ホルモン不応症を起こし得ると考えられ、今後αF397Xを発現させたトランスジェニックマウスを作成し、生存の可能性や表現型を観察する方針である。