甲状腺ホルモン受容体C末端側転写活性ドメインの機能解析

甲状腺激素受体C端转录激活域的功能分析

• 批准号: 08770814
• 负责人: 西山 孝三
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770814/
• 关键词: T_3受容体(TR); 甲状腺ホルモン不応症; T_3応答領域(TRE); ドミナントネガテイブ作用; レチノイドX受容体(RXR)

機能的なT_3受容体(TR)にはα1とβ1がある。我々は、TRα1とβ1のC端にある転写活性ドメインの機能の差を調べるため、全身型甲状腺ホルモン不応症で発見されたC端11個のアミノ酸を欠失する異常TRβ1(βF451X)と、これと全く同一のC端欠失を持つよう作成した異常TRα1(αF397X)を用い、種々のTR応答領域(TRE)における両者の機能の差を比較検討した。1,consensus TREであるpalindrome(Pal)、direct repeat(DR4)やnative TREであるmalic enzyme(ME)、myosin heavy chain α(MHCα)、lysozyme silencer(F2)における正常TRα1、TRβ1に対するドミナントネガテイブ作用を比較した。ドミナントネガテイブ作用はTRE依存性で、Pal、DR4、F2においてはβF451Xの方がαF397Xよりも有意に強いドミナントネガテイブ作用を示したが、MHCα、MEでは両者に差を認めなかった。正常TRに対する選択性はなく、βF451XがTRβ1を、αF397XがTRα1をより強く阻害するといったことはなかった。2,DR4においてパートナー蛋白であるレチノイドX受容体(RXR)を同時発現させた場合、αF397Xのドミナントネガテイブ作用は増強したがβF451Xのそれは変化しなかった。3,T_3非存在時、DR4とPalにおいてαF397XもβF451Xと同様に基礎転写活性を抑制した。4,酵母の転写因子GAL4のDNA結合ドメインとRXRの融合蛋白に対する親和性は、αF397Xの方がβF451Xよりも有意に強かった。以上より、αF397XもβF451Xと同様に5種のTREで強いドミナントネガテイブ作用を示すこと、ドミナントネガテイブ効果はTRE依存性で、ある種のTREではβF451Xの方がαF397Xよりも強いドミナントネガテイブ作用を発揮すること、RXRとの親和性や充分量のRXR存在下でのドミナントネガテイブ作用に両者で差があることが明らかとなった。αF397Xも甲状腺ホルモン不応症を起こし得ると考えられ、今後αF397Xを発現させたトランスジェニックマウスを作成し、生存の可能性や表現型を観察する方針である。

Functional なT_3 acceptor (TR)に α1とβ1がある. I 々 は, 1 と TR alpha beta 1 the c-terminal に の あ る planning write activity ド メ イ ン の function poor の を adjustable べ る た め, whole body type thyroid ホ ル モ ン 応 disease で 発 see さ れ た C end 11 の ア ミ ノ acid を owe lost す る abnormal TR beta 1 (beta F451X) と, こ れ と く same の C end owe all lost を hold つ よ う made し た abnormal TR alpha 1 (alpha F397 X)を uses を and 々 <s:1> TR応 to answer the field (TRE)における. The <s:1> function <e:1> of the two is <s:1> poor を. Compare 検 and た. consensus TREであるpalindrome(Pal), direct repeat(DR4)やnative TREであるmalic enzyme(ME), myosin heavy chain α(MHCα), lysozyme silencer(F2)における the effects of normal TRα1 and TRβ1に on するド ナ ナ トネガテ ブ ブ ブ を comparison of た た. ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ ブ role は TRE dependency で, Pal, DR4, F2 に お い て は beta F451X の party が alpha F397X よ り も intentionally に strong い ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ を ブ role し た が, MHC alpha, ME で は struck the poor に を recognize め な か っ た. Normal TR に す seaborne る sentaku sex は な く, beta F451X が TR 1 を beta, alpha F397X が TR alpha 1 を よ り く strong resistance against す る と い っ た こ と は な か っ た. 2, DR4 に お い て パ ー ト ナ ー protein で あ る レ チ ノ イ ド X by the capacity of body (RXR) を 発 now at the same time さ せ た occasions, alpha F397X の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ ブ role は raised strong し た が beta F451X の そ れ は variations change し な か っ た. 3, T_3 not to exist, DR4 と Pal に お い て alpha F397X も beta F451X と with others に based planning write inhibition し を た. 4, yeast の planning write factor GAL4 の dna-binding ド メ イ ン と RXR の fusion protein に す seaborne る affinity は, alpha F397X の party が beta F451X よ り も intentionally に strong か っ た. Above よ り, alpha F397X も beta F451X と with others に five の TRE で strong い ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ を ブ role す こ と, ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ ブ unseen fruit は TRE dependency で, あ る kind の TRE で は beta F451X の party が alpha F397X よ り も strong い ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ ブ role を 発 swing す る こ と, R XR と の affinity や で in the presence of sufficient quantity の RXR の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ イ ブ role に struck the poor で が あ る こ と が Ming ら か と な っ た. Alpha F397X も thyroid ホ ル モ ン 応 disease since を こ し have る と exam え ら れ, future alpha F397X を 発 now さ せ た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を made し possibility, survival の や phenotype を 観 examine す る policy で あ る.

项目成果

西山孝三、中村浩淑: "甲状腺ホルモン不応症におけるTR異常" Modern Physician(新興医学出版社). 15(6). 785-789 (1995)

Kozo Nishiyama、Hiroyoshi Nakamura：“甲状腺激素不应性的TR异常”现代医师（新光医学出版社）15（6）（1995）。

西山孝三、中村浩淑: "甲状腺ホルモン不応症" 内分泌・糖尿病科(科学評論社). 2(4). 359-367 (1996)

Kozo Nishiyama，Hiroyoshi Nakamura：“甲状腺激素难治性”内分泌和糖尿病系（Kagaku Hyoronsha）2（4）359-367（1996）。

Sinichirou Andoh: "Introducing a point mutation identified in a patient with pituitary resistance to thyroid hormone (Arg 338 to Trp) into other mutant thyroid hormone receptors weakens their dominant negative activities." J.Endocrinol.151(2). 293-300 (19

Sinichirou Andoh：“将垂体对甲状腺激素（Arg 338 至 Trp）抵抗的患者身上发现的点突变引入其他突变的甲状腺激素受体中，会削弱其显性负活性。”