胆道上皮の立体培養による先天性胆道形態異常発生機序に関する研究

利用胆道上皮三维培养研究先天性胆道异常的机制

• 批准号: 08770978
• 负责人: 森 倫人
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770978/
• 关键词: 胆嚢粘膜上皮細胞; コラーゲンゲル培養; ペプチド成長因子; 先天性胆道形態異常

我々は、胎生期における肝胆道系の形態形成が前腸からの肝臓憩室(hepatic diverticulum)の頭側肝窩は肝臓の原基となり、尾側肝窩は拡張して胆嚢を形成しその茎部が胆管となることに着目し、胎生期における形態形成調節機構は上皮-間葉相互作用が重要であり、この両者の異なった形態は周囲の線維芽細胞もしくは線維芽細胞由来の液性因子によって調節されていると考えた。胆嚢粘膜上皮の形態形成調節機構の解析家兎胆嚢粘膜上皮を3次元コラーゲンゲル内で培養し初代培養おび継代培養において、各種ペプチド成長因子や線維芽細胞(MRC-5、WI-38、BALB3T3)と同時培養することにより、コラーゲンゲル内の胆嚢上皮の形態調節因子について研究してきた。その結果、胆嚢上皮の形態はHGFやTGF-b等の種々のペプチド成長因子、1991年に平井らによりクローニングされた間葉系細胞の膜蛋白質であるエビモルフィン、さらには線維芽細胞の培養上清中の新規の蛋白質などにより調節されていることが判明し、その過程を組織化学的および超微構造的解析を中心に解明を行ってきた。その結果、超微構造的には上皮細胞の形態形成には極性を持ったVAC(vacuolar apical component)エキソサイトーシスを介した形態形成機構が観察され、免疫組織化学的には細胞間接着分子カドヘリンおよび細胞基質間接着分子インテグリンの発現が密接に関与しており、これらの発現には上記ペプチド成長因子によりその発現に差がみられることが判明した。また、これらの形態形成に最も関与していると思われる線維芽細胞上清培地中の新規蛋白質のcharacterizationでは、分子量100,000以上の凍結融解および60℃加温にて失活する新規蛋白質であることが判明した。今後頭側肝窩のインビトロモデルとしての肝内胆管上皮細胞の立体培養を確立し、胆嚢上皮細胞と胆管上皮細胞の形態形成調節機構の相違について検討する予定である。

The shape of the hepatobiliary system in the prenatal and postnatal period is characterized by the formation of the hepatobiliary diverticulum (hepatic diverticulum), the liver, the primordium, the tail, the stem, the bile duct, the eyes, the fetal phase, the epithelium-the interaction between the liver and the liver, the epithelium-bile duct interaction. The source of the cell, the liquid factor, the cell, the cell. Biliary mucosal epithelial morphogenesis mechanism the biliary mucosal epithelia were cultured for 3 times. The primary culture of biliary mucosal epithelial cells and the growth factors of various growth factors (MRC-5, WI-38, BALB3T3) were carried out at the same time. The results of the test, several growth factors such as biliary epithelial morphology, HGF and TGF-b, the cell membrane protein profile of the cell membrane protein chain of 1991, the cell culture supernatant of cell culture, and the identification of new regulation protein in the supernatant of cell culture. The analytical center of tissue chemistry in the process of tissue chemistry is used to understand how to do this. The results showed that the morphology of the ultrastructurally constructed epithelial cells was characterized by VAC (vacuolar apical component). The morphology of the cells was examined by the morphology formation mechanism, the immuno-histochemistry was followed by the molecular affinity between the cell bases, and the tight junction was detected by molecular chromatography. It is important to determine whether there is a difference in the growth factor. In the supernatant of supernatant culture, the molecular weight of characterization, molecular weight, molecular weight, temperature, molecular weight, temperature, molecular weight, molecular weight, temperature, temperature, In the future, the liver and bile duct epithelial cells will be established by three-dimensional culture, and the bile duct epithelial cells will form the morphology of the bile duct epithelial cells. in the future, the hepatocytes will be confirmed by three-dimensional culture of intrahepatic bile duct epithelial cells.