DNAと転写調節因子の結合に対する腎虚血-再灌流の影響

肾缺血再灌注对 DNA 和转录调节因子结合的影响

• 批准号: 08771206
• 负责人: 諸岡 浩明
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771206/
• 关键词: 虚血; 再灌流; 転写活性化因子

今年度に行った研究:ラットの腎臓を用いた虚血-再灌流モデルでは、ATF-2、AP-1、Jun2TREを用いたゲルシフトでは再灌流後に結合が増強したが、NF-κBでは結合に明らかな増強が見られなかった。脳を用いて、虚血-再灌流を作成し転写活性化因子とDNAの結合を調べたが、腎臓と比べると、虚血を起こす以前より結合が強く、ATF-2、AP-1に関しては虚血-再灌流による更なる増強は認めなかったが、Jun2TREでは再灌流により増強を認めた(NF-κBに関しては未施行)。しかし、MAPキナーゼの活性亢進は見られず、蛋白質のリン酸化の関わりはなお不明である。また、心臓による虚血-再灌流モデルを、培養心筋細胞およびラット摘出心を用いて試みたが、培養心筋細胞の作成はまだ半ばであり、ラット摘出心にてもモデルの確立にいたっておらず、明らかな結果を得るに至っていない。今後の研究の展開:虚血-再灌流を腎臓、脳、心臓によるモデル、あるいは培養細胞を用いて作成し、NF-κBや他の転写活性化因子とDNAの結合が増強するかどうかを検討する。有意に増強する臓器および因子があれば、蛋白質のリン酸化がどの程度関わっているかを明らかにしたい。

今年进行的研究：在使用大鼠肾脏的缺血再灌注模型中，使用ATF-2，AP-1和JUN2TRE增强了再灌注后的结合，但在NF-κB中没有明显增强的结合。使用大脑，创建缺血 - 再灌注以检查转录激活剂和DNA的结合。与肾脏相比，结合比发生缺血之前的结合要强，并且由于局部灌注灌注不足，未观察到ATF-2和AP-1的进一步增强，但是JUN2TRE由于再灌注而显示出增强（未对NF-κB进行）。然而，未观察到MAP激酶的活性，并且蛋白质磷酸化的参与仍然未知。此外，尽管使用培养的心肌细胞和大鼠切除的心脏尝试了心脏的缺血 - 再灌注模型，但培养的心肌细胞的产生仍在中间，即使在大鼠的心脏中也没有建立模型，并且没有获得清晰的结果。未来的研究发展：使用肾脏，大脑或心脏模型产生缺血 - 再灌注，或使用培养的细胞检查是否通过NF-κB和其他转录激活剂来增强DNA结合。如果有明显增强的器官和因素，我们要阐明涉及蛋白质磷酸化的程度。