c-fosを指標とした鍼灸刺激の伝達・鎮痛機構の解明

以c-fos为指标阐明针刺刺激的传导及镇痛机制

• 批准号: 08771238
• 负责人: 福田 文彦
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Meiji College of Oriental Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771238/
• 关键词: 灸刺激; c-fos; Fos蛋白; Enkephalin; 伝達機構; 鎮痛機構; 免疫組織科学; in situ hibridization

【目的】鍼灸治療の効果として最も顕著なものに鎮痛効果がある。そこで灸刺激の伝達・鎮痛機構を解明するためにc-fosを指標として形態学的に検討した。c-fosは細胞外からの刺激に応じて早期に発現し、蛋白・酵素・ペプチドなどの産生(特にEnkephalinやDynorphinなどのオピオイドペプチド)に関与している。【方法】実験動物にウイスター系ラット(250〜350g)を使用した。灸刺激は重さ1g、直径0.7mm、高さ2mm、燃焼温度約120℃のペレット状のもぐさを作成し、麻酔下のラットの足底指球部に燃焼させた。1.灸刺激10荘後の時間経過に伴う脊髄後角に発現するFos陽性細胞の分布様式の違いを免疫組織化学を用いて検討した。2.灸刺激の回数を1回、5回、10回、20回、100回行い刺激2時間後の脊髄後角に発現するFos陽性細胞の分布様式の違いを免疫組織化学を用いて検討した。3.灸刺激10荘1時間後のEnkephalinとc-fosの関係をin situ hibridization法と免疫組織化学を用いて検討した。【結果・考察】10荘の灸刺激では、L4、L5のレベルで刺激後0.5時間から12時間までc-fosの陽性細胞が確認された。刺激2時間後には、後角のI・II層を中心に最も多くの陽性細胞が見られ、時間の経過とともにIV・V層に多く見られるようになった。また荘数の増加とともに、陽性細胞の数は増加した。この結果は、灸刺激による1次知覚の入力は、AδおよびC線維を介して脊髄後角に伝達され、上位中枢へ伝達されると考えられる。また荘数の増加に伴う陽性細胞の数の増加は、刺激量により賦活される細胞が増加していると考えられる。今後は、刺激量(灸の荘数)と時間経過に伴う陽性細胞の分布様式をさらに追究し、刺激量と賦活される細胞数やその経過を明らかにしたい。一方in situ hibridization法の検討からFos陽性細胞の中にはEnkephalin mRNAを有する細胞が確認された。この結果は、灸刺激に伴うFos陽性細胞の中には、鎮痛機構に働く細胞も賦活され、灸刺激に伴う鎮痛機構の一端をになうものと考えられる。今後は、更にmRNA発現の時間経過や他のペプチド等でも追究していきたい。

[Objective] Acupuncture treatment effect is the most effective and analgesic effect. The mechanism of stimulation and analgesia is discussed in detail. c-fos is related to the early development of extracellular stimulation, protein enzyme production (especially Enkephalin and Dynorphin), and the development of c-fos. [Method] Use the animal feed system (250 ~ 350g). Moxibustion stimulation weight is 1g, diameter is 0.7mm, height is 2mm, combustion temperature is about 120℃, the shape of the foot is made, and the foot part of the foot is burned. 1. The distribution pattern of Fos-positive cells was examined by immunohistochemistry after 10 weeks of moxibustion stimulation. 2. The distribution pattern of Fos positive cells in the dorsal horn of the spinal cord was studied by immunohistochemistry after 1, 5, 10, 20 and 100 cycles of moxibustion stimulation. 3. The relationship between Enkephalin and c-fos after moxibustion stimulation was studied by situ inhibition and immunohistochemistry. [Results·Investigation] 10 days after stimulation, c-fos positive cells were identified at 0.5 and 12 days after stimulation. After stimulation 2, most of the positive cells were found in the center of layer I and II, and most of the positive cells were found in layer IV and V after stimulation 2. The number of positive cells increased. The results showed that the first time the stress was detected, the Aδ and C line dimensions were detected, and the posterior angle of the spine was detected. The increase in the number of cells was accompanied by an increase in the number of positive cells, an increase in the amount of stimulation, and an increase in the number of activated cells. In the future, the amount of stimulation (number of cells) and the distribution pattern of positive cells were investigated. A method of in situ inhibition was used to detect Fos positive cells and to identify cells with Enkephalin mRNA. The results showed that moxibustion stimulation was accompanied by Fos positive cells in the middle, analgesic mechanism in the middle and analgesic mechanism in the middle. In the future, the time of mRNA expression will be investigated after other selection.