破骨細胞の分化過程における接着分子の発現調節機構に関する研究

破骨细胞分化过程中粘附分子表达调控机制研究

• 批准号: 08771934
• 负责人: 三木 美麗
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771934/
• 关键词: 破骨細胞; M-CSF; 活性型ビタミンD; 吸収窩; インテグリン; 末梢血リンパ球・単球; 接着分子; 分化

骨は巧みな適応性を備え、添加と吸収の調和のとれたリモデリングにより、内部構造や形態を変化させ適切な調和を維持する。骨吸収を司る破骨細胞の分化過程に関する研究は活発に行われている分野であるが、未知の部分が多い。本研究は破骨細胞の分化過程と接着分子の発現と消退を詳細に検討することにより、どのような分子がどの形成stepでcriticalな役割を果たしているのかを明らかにし、さらにそのstepを制御する因子を同定することを目的とする。本年度の研究において明らかになったことを以下に示す。(1)ヒト末梢血より、Ficoll-Isopaqueによる比重遠心法でヒト末梢血中に存在するリンパ球・単球画分(PBL)を採取し、10%FBS添加αMEM培地中で、PBLを培養すると、経日的に破骨細胞の特徴である酒石酸抵抗性酸ホスファターゼ活性陽性の多核巨細胞(TR (+) MNC)の形成が増加した。(2) PBLをM-CSF (マクロファージコロニー刺激因子)存在下で培養すると4日目から非付着性と付着性細胞が増加し、PBLのDNA合成は7日にピークが示された。すなわち、分画された末梢血リンパ球・単球はM-CSFに対して感受性があり、そのレセプターを有していることが示唆された。(3) M-CSFによりwell中のTR (+) MNCの総数は増加するが、単位細胞あたりのTR (+) MNCの数は減少した。(4) 1α, 25 (OH) 2D3を培養開始時に添加するとTR (+) MNCの形成は抑制され、培養7日目以降の添加でその数は増加した。活性型ビタミンD3は、分化段階によってその作用が異なることが示唆された。(5)牛歯根切片上で培養すると培養14日目以降で吸収窩の形成がわずかに認められた。すべてのTR (+) MNCが骨吸収活性を有してはいなかったが、一部の細胞は吸収活性を有していた。ヒト末梢血中に存在するリンパ球・単球画分(PBL)から誘導されるTRAP陽性の多核巨細胞は、破骨細胞としての特徴をある程度有する細胞が誘導されることが明らかになった。細胞膜表面に発現している接着分子についてはマクロファージ分化抗原とともに現在検索中である。

The structure of the structure is suitable for the preparation, addition, absorption and coordination. The study of osteoclast differentiation process in bone resorption has been carried out in different fields and unknown parts. This study discusses in detail the process of differentiation and subsequent molecular development and regression of osteoclasts. This year's research is shown below. (1)The characteristics of osteoclasts and the formation of active multinucleated giant cells (TR (+) MNCs) in peripheral blood were increased when PBL was cultured with 10% FBS supplemented with αMEM. (2)PBL M-CSF was cultured in the presence of non-adherent cells on day 4 and DNA synthesis of PBL was increased on day 7. In addition, the M-CSF sensitivity of the peripheral blood was also detected. (3)The total number of TR (+) MNCs in M-CSF cells increased, while the number of TR (+) MNCs in M-CSF cells decreased. (4)1α, 25 (OH) 2D3 was added at the beginning of culture to inhibit MNC formation, and the number of TR (+) additions increased after 7 days of culture. The active type D3 is different from the differentiation stage. (5)After 14 days of culture, the formation of absorption pits was observed. The TR (+) MNC has bone resorption activity, and some cells have resorption activity. It is clear that TRAP-positive multinucleated giant cells and osteoclast cells with characteristics similar to those of osteoclasts can be induced by the presence of mononuclear cells (PBLs) in peripheral blood. Cell membrane development and molecular differentiation

项目成果

Chiba, M: "Retinoic acid stimulates expression of the functional osteoclast integrin αvβ3 : Transcriptional activation of the β3 but not αv gene." Journal of Cellular Biochemistry. 62. 467-475 (1996)

Chiba, M：“视黄酸刺激功能性破骨细胞整合素 αvβ3 的表达：β3 基因的转录激活，但不是 αv 基因。” 细胞生物化学杂志 62. 467-475 (1996)。

清水 義信: "ヒト末梢血リンパ球・単球の培養中に見られるTRAP陽性多核巨細胞について" 歯科基礎医学会雑誌. 38. 447 (1996)

Yoshinobu Shimizu：“关于在人外周血淋巴细胞和单核细胞培养物中观察到的 TRAP 阳性多核巨细胞”日本基础牙科医学会杂志 38. 447 (1996)。

清水 義信: "In vitro培養したヒト末梢血リンパ球/単球から形成された破骨細胞様細胞と骨吸収窩." 歯科基礎医学会雑誌. 39. (1997)

Yoshinobu Shimizu：“体外培养的人外周血淋巴细胞/单核细胞形成的破骨细胞样细胞和骨吸收坑。”日本基础牙科医学会杂志 39。（1997）