ラット小脳における発生段階特異的な神経細胞死の機構

大鼠小脑发育阶段特异性神经细胞死亡机制

基本信息

  • 批准号:
    08780752
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

神経発生が進行する過程での発生段階特異的な神経細胞死の機構を解明するために、ラット小脳の切片培養系を用いて、外顆粒層と内顆粒層の顆粒細胞死及びその調節機構を検討した。TUNEL法及び蛍光色素を用いた色素排除法によって、外顆粒層と内顆粒層の細胞死を検出した。外顆粒層においては、培地中からinsulinを除去することにより、TUNEL法陽性・色素排除法陰性の細胞死(アポトーシス)が誘導された。一方、内顆粒層においては、insulinの有無に関わらず、色素排除法陽性・TUNEL法陰性の細胞死が見られた。蛋白合成阻害剤により、前者は抑制され、後者は抑制されなかった。以下、前者(外顆粒層でのinsulin感受性アポトーシス)について詳細に検討した。(1)TUNEL法と発生段階特異的マーカー蛋白に対する抗体染色との二重染色を行った結果、アポトーシス細胞の一部が増殖細胞マーカー(PCNA)を発現していたのに対し、増殖終了直後の顆粒細胞のマーカー(TAG-1)を発現しているものは皆無であった。(2)IGF-Iアナログは、insulinよりも低濃度でこのアポトーシスを抑制した。(3)ICE様プロテアーゼ阻害剤がこのアポトーシスを抑制した。アポトーシス条件で、ICEの発現量の増加は認められなかったが、ICE様プロテアーゼ活性の増加が認められた。(4)高濃度のK処理は、このアポトーシスを部分的に抑制した。以上のように、切片培養系を有効に活用することにより、発生中の小脳において顆粒細胞の発生段階に特異的な細胞死の機構が存在することが示された。外顆粒層での細胞死はアポトーシスの性質を有し、増殖中の細胞で特異的に起こるものであり、ICE様プロテアーゼが関与し、IGF-I受容体刺激により抑制されることが明らかになった。このアポトーシスの少なくとも一部はK非感受性であることが示唆された。内顆粒層で起こる細胞死の機構については、今後の課題として残った。また、他のICEファミリープロテアーゼの関与やその活性化機構も今後の重要なテーマの一つである。
The mechanism of cell death in different stages of neurogenesis was studied, including the application of culture system, the mechanism of cell death in outer granular layer and inner granular layer, and the mechanism of regulation. TUNEL method and pigment exclusion method were used to detect the cell death in outer granular layer and inner granular layer. In the outer granular layer, there is no change in the cell death induced by TUNEL positive and pigment exclusion negative. A square, inner granular layer, insulin, pigment exclusion method positive, TUNEL method negative, cell death. Protein synthesis is inhibited, the former is inhibited, and the latter is inhibited. The following is a detailed discussion of the former (insulin sensitivity in the outer granular layer). (1) TUNEL method and the development of segment-specific antibody staining results, part of the development of cell culture (PCNA) and development of straight granulosa cells (TAG-1) were not found in the middle. (2) IGF-I is a kind of low concentration insulin inhibitor. (3) ICE is the most effective way to control the flow of electricity. The conditions for the production of ICE and the increase in ICE activity (4)High concentration of K treatment can inhibit the growth of the disease. The above sections of culture system are useful for the development of granular cells and the existence of specific cell death mechanisms. The properties of cells in the outer granular layer are different, and cells in the growth process are different. ICE is different from IGF-I. IGF-I is different from IGF-I. A part of the problem is not sensitive. The inner granular layer is the starting point of the cell death mechanism, and the future problem is the residual one. The key to the future development of active mechanisms is to ensure that they are fully integrated into the society.

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
M.Tanaka et al.: "Insulin-like growth factor-I as a protective signal for apoptosis of developing cerebellar grannle neurons." Soc.Neurosci.Abstr.22. 1960- (1996)
M.Tanaka 等人:“胰岛素样生长因子-I 作为发育中小脑颗粒神经元凋亡的保护信号。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Tanaka et al.: "Cerebellar cortical development and regulation of granule cell apoptosis in organotypic slice cultures." Dev. Neurosci.19(1). 129- (1997)
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M. Tanaka et al.: "Invalvement of the interleukin-1β converting enzyme family in apoptosis of external granular layer neurons of rat cerebellum." Neurochem. Res.(in press).
M. Tanaka 等人:“白细胞介素 1β 转换酶家族对大鼠小脑外部颗粒层神经元细胞凋亡的影响”(Neurochem Res)。
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