胎児期の脳に独特な新しい情報伝達機構の解析

胎儿大脑特有的新信息传递机制分析

• 批准号: 08780748
• 负责人: 萩原 民雄
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780748/
• 关键词: 脳; 胎児特異的タンパク質; cDNA; Gタンパク質

1.タンパク質の精製法の確立と機能活性の証明(1)申請者はこれまで一次構造解析を主眼におき、目的タンパク質を胎児脳可溶性画分よりイオン交換クロマトグラフィーによる部分精製と調製用電気泳動により単離してきたため、未変性の機能的活性を保持したタンパク質を得るため精製法を確立した。(2)得られた未変性タンパク質を用いて実際にGDI活性およびGAP活性を有するか否かを測定するためRanおよびRhoタンパク質の精製を行ったが、充分な量の精製標品を得ることが出来なかったので、現在、既に報告されているRanおよびRho cDNAの塩基配列をもとにcDNAをクローニングしてrecombinant proteinを調製している。2.特異抗体の作成既に得られている部分一次構造をもとに合成ペプチドを作成し、ヘモシアニンと架橋したものを抗原として、現在、ウサギを免疫中であるが充分な抗体価を得られていない。3.cDNAをクローニング既に得られている部分一次構造をもとにオリゴヌクレオチドプライマーを作成し、胎生17日目ラット胎児脳より調製したmRNAを鋳型にRT-PCRを行い得られた産物の塩基配列決定を行っている。現在、部分的なcDNAを得ている。

1. The precision method ensures that the activity of the machine is clear. (1) the applicant is responsible for one-time analysis of the main eye, the purpose of the pregnancy, the soluble picture of the tire, the exchange of the equipment, the performance of the parts of the equipment, the electrophoretic activity of the electrophoretic device, the application of the electrophoretic method. The activity of sexual machinery is maintained. The accuracy of the method is confirmed by the method of precision. (2) it is necessary to determine whether or not to determine the accuracy of the GDI activity, the Rho activity, the Rho activity, the accuracy, the accuracy and the accuracy. Both reports, Ran, Rho cDNA, base column, cDNA, recombinant protein, recombinant protein, database, etc. two。 The specific antibody has been made in the first part of the experiment, and the antibody has been synthesized in one time, and the antigen has been detected. The 3.cDNA has obtained the following information: the first step is to determine the number of items in the column to determine the size of the row. After the birth of the fetus on the 17th day, the baby was born on the 17th day of the birth. The baby was born on the 17th day of the birth, and the RT-PCR was divided into two groups. At present, some of the "cDNA" have got a lot of money.