3重鎖DNA安定化能を有するポリカチオングラフト共重合体の設計

具有三链DNA稳定能力的聚阳离子接枝共聚物的设计

• 批准号: 09750967
• 负责人: 丸山 厚
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09750967/
• 关键词: ポリカチオン; グラフト共重合体; 3重鎖DNA; アンチジーン; 遺伝子治療; コラーゲン; オリゴヌクレオチド; ポリリジン; I型コラーゲン; 3重鎖形成性オリゴヌクレオチド; ゲルシフトアッセイ; 抗遺伝子医薬

親水性の高分子鎖をポリカヂオン側鎖に導入したポリカチオングラフト共重合体を設計し、そのDNAとの相互作用を詳細に検討してきた。その過程で多糖であるデキストランをグラフト化したポリリジン(PLL-g-Dex)が、DNAと見掛け上可溶性の複合体を形成し、さらにグラフト率の高いグラフト共重合体は、DNA間の2重鎮あるいは3重鎖形成を阻害することなくその形成を安定化する機能を有することをpoly(dA)・poly(dT)2重鎮およびpoly(dA)・2poly(dT)3重鎮の融解曲線解析より明らかにした。3重鎮形成法は2重鎮DNAである遺伝子自体を標的としその機能を制御する手法としての展開がなされている。そこで、本研究ではラットI型コラーゲン遺伝子のプロモーター領域を標的配列とし、3重鎮形成性オリゴヌクレオチドを設計し、その3重鎖形成能をゲル電気泳動度シフトアッセイにより解析した。フーグスティーン型の水素結合を介して形成される3重鎮DNAは、酸性pHでは、極めて良好な3重鎮を形成するものの、生理pHではほとんど3重鎖形成は見られなかった。一方、同様な条件でグラフト共重合体を存在させることにより、生理pHでも3重鎮が形成されることがわかった。一方、3重鎖DNAのもう一つのモチーフである逆フーグスティーン型の水素結合を介した3重鎮形成は、細胞内濃度のカリウムイオンの存在により強く阻害される。しかし、グラフト共重合体を存在させることにより、カリウムイオンの阻害効果をほぼ完全に克服できることがわかった。グラフト共重合体のこのような3重鎖DNA安定化機能は、他の安定化剤に比べ極めて高く、3重鎮DNA形成を利用した遺伝子発現制御法を実現に近づける上で貴重な知見が得られた。

Water-borne high molecular weight (HMW), high molecular weight, high molecular weight, high During the process, the polysaccharides were purified and purified. The formation of soluble complex (PLL-g-Dex), the formation of soluble complex (PLL-g-Dex), and the high rate of homozygosity in DNA were detected. The DNA system has two major components, three components, the second, the second, the second, (3) the method of double formation. (2) the mechanism of the DNA system is able to control the manipulation of the system. The purpose of this study is to analyze the performance of the equipment in the field of health care in the field of training, the design of the equipment, and the analysis of the equipment in the field of swimming in this study. in this study, the equipment of the model I and this study is used in this study, and the equipment is designed and analyzed. The three-fold DNA, acid pH, extreme good, physiological pH and physiological pH were formed by the combination of water and water to form three-fold, two-fold, three-fold, two-fold, two-step, one-step, two-step, two-step, one-step, two-step, one-step, two-step, One side, the same condition, the same condition, the same weight, the same condition, the same condition, the same condition and the same condition. On the one hand, there is a high concentration of DNA on the other hand, and there is a strong resistance to the formation of water in combination with the formation of high concentration of water and the presence of intracellular temperature. There are some problems in the coincidence between the two parts of the body, and the results show that they can completely overcome the problem. In this system, the stability of DNA is much higher than that of other stabilizers, and that of three-fold DNA is higher than that of other stabilizers, and that of three-fold DNA is better than that of others.

项目成果

H.Torigoe: "Poly(l-lysine)-graft-dextran copolymer promotes pyrimidine motif triplex DNA formation at physiological pH.Thermodynamic and kinetic studics." J.Biol.Chem.274. 6161-6167 (1999)

H.Torigoe：“聚（L-赖氨酸）-接枝-葡聚糖共聚物在生理 pH 下促进嘧啶基序三链体 DNA 的形成。热力学和动力学研究。”

S.Asayama: "Synthesis of novel polyampholyte comb-type copolymers consisting of poly(L-lysine)backbone and hyaluronic acid side chains for a DNA carrier" Bioconjugate Chem.9. 476-481 (1998)

S.Asayama：“由聚（L-赖氨酸）主链和透明质酸侧链组成的新型聚两性电解质梳型共聚物的合成，用于 DNA 载体”Bioconjugate Chem.9。

丸山 厚: "3重鎖核酸による遺伝子の新しい発現制御法" 遺伝子医学. 2. 204-209 (1998)

Atsushi Maruyama：“使用三链核酸控制基因表达的新方法”《遗传医学》2. 204-209 (1998)。

A.Maruyama: "Characterization of polyelectrolyte complex between DNA and polylysine-g-dextran copolymer" Bioconjugate Chem.9. in press (1998)

A.Maruyama：“DNA 和聚赖氨酸-g-葡聚糖共聚物之间的聚电解质复合物的表征”Bioconjugate Chem.9。

A.Maruyama: "Poly (L-Iysine)-graft-dextran copolymer is a novel stabilizer of triplex DNA(I) : Stabilization of poly(dA)・2poly(dT) triplex" Nucleic Acid Sym.Ser.37. 225-227 (1997)

A.Maruyama：“聚（L-赖氨酸）-接枝-葡聚糖共聚物是三链体 DNA（I）的新型稳定剂：聚（dA）·2聚（dT）三链体的稳定”核酸 Sym.Ser.37-。 227 (1997)