权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

異種タンパク質の大腸菌ペリプラズムへの分泌生産にともなうストレス応答の解析

与外源蛋白分泌到大肠杆菌周质相关的应激反应分析

基本信息

批准号：
09760074
负责人：
門倉広
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760074/
关键词：
大腸菌ペリプラズムタンパク質分泌ストレス応答

项目摘要

1・σE系活性化およびdegPの発現誘導現象がもつ生理的意義の解析前年度は、ペリプラズムに異種蛋白質を作らせた場合にσE系が活性化され、ベリプラズムプ口テアーゼ遺伝子degP、および熱ショックシグマ遺伝子rpoEとrpoHの転写量が上昇することを明らかにした。本年度はこれらの誘導現象の生理的意義を解析した。σEを欠損する大腸菌では異種蛋白質のぺリプラズム生産により生育が著しく阻害を受けた。よって、ストレス下の大腸菌の生存維持にσE系の存在が必要であることがわかった。更にペリプラズムに輸送した異種蛋白質は、野生株では合成後がすみやかに分解を受けたのに対し、degP欠損株ではペリプラズム中で顕著に安定化した。よってDegPにはストレス下σE系により発現が誘導され、ペリブラズム中の異種蛋白質を分解除去する働きがあることが示唆された。2・異種タンパク質を生産させる場所を変化させた場合のストレス応答の解析膜透過のためのシグナル配列に、蛋白質をリポプロテイン化しこれを内膜と外膜とに輸送しわける変異を導入した。この変異型遺伝子の発現を誘導し、異種蛋白質が到達する場所を変えたときのストレス応答を解析した。その結果、いずれの場合も、σE系が活性化することが明らかになった。外膜プロテアーゼ遺伝子ompTの場合でのみ蛋白質の局在部位の違いによりその遺伝子発現に変化が認められた。現在この制御がもつ生体内での意義について解析を進めている。1・でみたようにストレスにより誘導されてくるもののなかから、実際にストレス要因の分解に働く因子がみつかった。このことから、誘導されてくる因子を更に探索することにより、ストレス要因の除去もしくはストレスを緩和するために働く因子をみつけることが可能なのではないかと考えられる。今後このような知見がよりよいタンパク質の分泌生産系の開発に役立つものと期待している。

1. Activation of σE series and activation of σE series in the present induction phenomenon of physiological significance.され、ベリプラズムプ口テアーゼ伝子degP、および热ショックシグマ伝子rpoEとrpoHの転がriseすることを明らかにした. This year's analysis of the physiological significance of induced phenomena. σE するEcoli bacteria では heterogeneous protein のぺリプラズムproduction によりproductive が出しく hindered をReceived けた.よって, ストレス下のcoliform's survival and maintenance にσE system's existence is necessary であることがわかった. Updated にペリプラズムにしたXenogeneic protein は, wild strain では synthesized がすみやかに points The answer is the solution, the degP is the stabilization of the damaged strain.よってDegP にはストレス下σE series により発 appear がinducing され、ペリブラズム中の外proteinをDecomposition and removal of する働きがあることがshows instigation された. 2. Different types of materials are produced in different places and places, and the conditions are different and the analytical membrane is passed through them.グナルalignment, protein をリポプロテイン化しこれをinner membrane and outer membrane とにtransportation しわける変different を introduction した. The heterogeneous protein is present and induced, and the heterogeneous protein arrives at the place where it is detected and analyzed.そのRESULT, いずれのoccasionも, σE series がactivation することが明らかになった. The outer membrane of the outer membrane is プロテアーゼ伝子ompTのoccasion でのみprotein localized part of the のviolation いによりその缝子発 appear に変化がcognizeめられた. Now このcontrol がもつ生内でのmeaning についてanalytic を入めている. 1・でみたようにストレスによりinducing されてくるもののなかから、実记にストレスcaust decomposition に働くfactor がみつかった.このことから, inducing されてくるfactor をにExplore することにより, ストレスcaution のremoval もしくはストレスをeasing するために働くfactor をみつけることがpossible なのではないかと卡えられる. From now on, the secret production system of the secretion and production system of the secretion and production system of the secretion and production system is expected to be the same.