トランスジェニックネマトーダを用いた生物検定法の確立

转基因线虫生物测定方法的建立

• 批准号: 09760308
• 负责人: 河野 強
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760308/
• 关键词: グルタミン酸; トランスポーター; 線虫; トランスジェニック; 生物検定法; クローニング; サブタイプ; キイロショウジョウバエ; C.elegans; gene expression

線虫のゲノムプロジェクト情報を詳細に検索したところ、グルタミン酸トランスポーター遺伝子には、報告者が既にクローニングしたもの(Ceglut-I)以外に3つのサブタイプが存在することが示唆された。そこで、これらの遺伝子について、RACE法を用いてcDNAレベルでの塩基配列の確認を行った。3つのサブタイプ(それぞれCeglut-II、-III、-IVと命名)はそれぞれ502、532、575アミノ酸残基よりなり、Ceglut-Iとは43.8%、55.8%、50.8%の相同性を示した。また、ゲノム遺伝子の構造を比較したところ、Ceglut-Iが9個のエキソンからなるのに対し、Ceglut-II、-III、-IVはそれぞれ11、7、8個のエキソンからなり、イントロンの長さもまちまちであった。さらに、アフリカツメガエル卵母細胞を用いた発現系では、Ceglut-IIおよび-IVはCeglut-Iとほぼ同等のグルタミン酸トランスポート活性を示したが、Ceglut-IIIはグルタミン酸トランスポート活性を殆ど示さなかった。このことから、Ceglu-IIIはグルタミン酸トランスポータースーパーファミリーに属する中性アミノ酸のトランスポーターである可能性が示された。そこで、Ceglut-I-II、-IVに対応する2本鎖RNAを合成し線虫に導入すること(RNAi)により転写阻害を試みたところ、際立った表現型は認められなかった。これは、神経系特異的に発現する遺伝子を標的にした場合、RNAiによる転写阻害が不完全であることによると考えられる。現在、変異剤およびUV照射を併用した遺伝子破壊株の作製を試みている。

The worms

项目成果

河野 強、他: "Pesthetoxin,a new phytotoxin produced by the gray blight fungus,Pestalotiopsis theae." Biosci.Biotechnol.Biochem.62. 1624-1626 (1998)

Tsuyoshi Kono 等人：“Pesthetoxin，一种由灰疫病真菌 Pestalotiopsis theae 产生的新植物毒素。Biosci.Biotechnol.Biochem.62 1624-1626 (1998)。

河野 強、他: "Comparison of precursor structures of the GGNG peptides derived from the earthworm Eisenia foetida and the leech Hirudo nipponia" Biosci.Biotechnol.Biochem.63. 443-445 (1999)

Tsuyoshi Kono 等人：“来自蚯蚓 Eisenia foetida 和水蛭 Hirudo nipponia 的 GGNG 肽的前体结构的比较”Biosci.Biotechnol.Biochem.63 (1999)。

河野強,他: "The leech excitatory peptide,a member of the GGNG peptide family:Isolation and comparison with the earthworm GGNG peptides" FEBS lett.410. 437-442 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“水蛭兴奋性肽，GGNG 肽家族的成员：与蚯蚓 GGNG 肽的分离和比较”FEBS lett.437-442 (1997)。

河野強,他: "A new type of pheromone biosynthesis activating neuropeptide of the silkworm Bombyx mori" Biosci.Biotech.Biochem.61. 1745-1747 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“一种新型的家蚕信息素生物合成激活神经肽”Biosci.Biotech.Biochem.61 1745-1747 (1997)。

河野 強、他: "Structures of insulin-like peptides of the nematode Caenorhabditis elegans." Pept.Sci.1998. (1999)

Tsuyoshi Kono 等人：“线虫类胰岛素肽的结构。Pept.Sci.1998”。