トランスジェニックネマトーダを用いた生物検定法の確立

转基因线虫生物测定方法的建立

• 批准号: 09760308
• 负责人: 河野 強
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760308/
• 关键词: グルタミン酸; トランスポーター; 線虫; トランスジェニック; 生物検定法; クローニング; サブタイプ; キイロショウジョウバエ; C.elegans; gene expression

線虫のゲノムプロジェクト情報を詳細に検索したところ、グルタミン酸トランスポーター遺伝子には、報告者が既にクローニングしたもの(Ceglut-I)以外に3つのサブタイプが存在することが示唆された。そこで、これらの遺伝子について、RACE法を用いてcDNAレベルでの塩基配列の確認を行った。3つのサブタイプ(それぞれCeglut-II、-III、-IVと命名)はそれぞれ502、532、575アミノ酸残基よりなり、Ceglut-Iとは43.8%、55.8%、50.8%の相同性を示した。また、ゲノム遺伝子の構造を比較したところ、Ceglut-Iが9個のエキソンからなるのに対し、Ceglut-II、-III、-IVはそれぞれ11、7、8個のエキソンからなり、イントロンの長さもまちまちであった。さらに、アフリカツメガエル卵母細胞を用いた発現系では、Ceglut-IIおよび-IVはCeglut-Iとほぼ同等のグルタミン酸トランスポート活性を示したが、Ceglut-IIIはグルタミン酸トランスポート活性を殆ど示さなかった。このことから、Ceglu-IIIはグルタミン酸トランスポータースーパーファミリーに属する中性アミノ酸のトランスポーターである可能性が示された。そこで、Ceglut-I-II、-IVに対応する2本鎖RNAを合成し線虫に導入すること(RNAi)により転写阻害を試みたところ、際立った表現型は認められなかった。これは、神経系特異的に発現する遺伝子を標的にした場合、RNAiによる転写阻害が不完全であることによると考えられる。現在、変異剤およびUV照射を併用した遺伝子破壊株の作製を試みている。

The information of the line bug is searched in detail. The information of the line bug is searched To confirm the nucleotide sequence of cDNA by RACE method 3. The identity of Ceglut-I was 43.8%, 55.8%, 50.8% respectively. The structure of Ceglut-I, Ceglut-II, Ceglut-III and Ceglut-IV is compared with that of Ceglut-I, Ceglut-II, Ceglut-III and Ceglut-IV. In addition, Ceglut-II and Ceglut-IV have been shown to have the same activity as Ceglut-I and Ceglut-III. Ceglu-III has the ability to modify the properties of the acid. 2. RNA synthesis and gene expression of Ceglut-I-II and Ceglut-IV genes. This is the case with the occurrence of a gene that is specific to the nervous system, and with the occurrence of a gene that is not completely detected by RNAi. At present, different types of UV irradiation are used together to make the production process of the seed plants.

项目成果

河野 強、他: "Pesthetoxin,a new phytotoxin produced by the gray blight fungus,Pestalotiopsis theae." Biosci.Biotechnol.Biochem.62. 1624-1626 (1998)

Tsuyoshi Kono 等人：“Pesthetoxin，一种由灰疫病真菌 Pestalotiopsis theae 产生的新植物毒素。Biosci.Biotechnol.Biochem.62 1624-1626 (1998)。

河野 強、他: "Comparison of precursor structures of the GGNG peptides derived from the earthworm Eisenia foetida and the leech Hirudo nipponia" Biosci.Biotechnol.Biochem.63. 443-445 (1999)

Tsuyoshi Kono 等人：“来自蚯蚓 Eisenia foetida 和水蛭 Hirudo nipponia 的 GGNG 肽的前体结构的比较”Biosci.Biotechnol.Biochem.63 (1999)。

河野強,他: "The leech excitatory peptide,a member of the GGNG peptide family:Isolation and comparison with the earthworm GGNG peptides" FEBS lett.410. 437-442 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“水蛭兴奋性肽，GGNG 肽家族的成员：与蚯蚓 GGNG 肽的分离和比较”FEBS lett.437-442 (1997)。

河野強,他: "A new type of pheromone biosynthesis activating neuropeptide of the silkworm Bombyx mori" Biosci.Biotech.Biochem.61. 1745-1747 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“一种新型的家蚕信息素生物合成激活神经肽”Biosci.Biotech.Biochem.61 1745-1747 (1997)。

河野 強、他: "Structures of insulin-like peptides of the nematode Caenorhabditis elegans." Pept.Sci.1998. (1999)

Tsuyoshi Kono 等人：“线虫类胰岛素肽的结构。Pept.Sci.1998”。