線虫Caenorhabditis elegansを用いた休眠打破機構の解明

利用线虫秀丽隐杆线虫阐明休眠打破机制

• 批准号: 09265216
• 负责人: 河野 強
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09265216/
• 关键词: nematode; C.elegans; diapause; gene expression; cloning

線虫Caenorhabditis elegansの生活環には「耐性幼虫形成」と呼ばれる現象が知られている。これは、生存に不利な環境に応答して一時的に生育を停止する現象であり、昆虫類の幼虫休眠と類似している。本研究の目的は、線虫C.elegansのいわゆる“休眠"が打破される機構を解明することにより昆虫類にも共通する重要な知見を得ることである。そこで本研究では、まず、耐性幼虫打破前後での動的変動を遺伝子レベルで解析することにした。C.elegansをegg plate法で大量調製し、食餌(大腸菌)が枯渇した状態に放置することにより耐性幼虫を形成させた。次いで、耐性幼虫の一部を食餌を十分に含んだ液体培地に移し、1時間、3時間および12時間振盪培養を行った。それぞれの線虫よりmRNAを調製し、differnetial display法をを用いて遺伝子発現パターンの差違を検出した。次いで、時期特異的に発現するバンドの塩基配列分析を行い、C.elegansのゲノムプロジェクト情報を検索した。次いで、RACE法を用いて全長cDNAの構造を明らかにした。さらに、ゲノムDNAの構造を推定した。differential displayによる発現パターン解析の結果、耐性幼虫においては、おおむね遺伝子発現が抑制されており、耐性幼虫打破の亢進に伴い、時期特異的な遺伝子発現が認められた。今回解析したクローンのうち、1時間後に特異的に発現する遺伝子は、リボゾームタンパクをコードしていたが、スプライシング制御に関わるSWAP遺伝子と連動する可能性が示唆され、興味深い。また、12時間後に特異的に発現する遺伝子は414アミノ酸残基よりなる新規タンパクをコードしていた。これは、他のタンパクと有意な相同性を示さず、機能は不明である。

The living environment of the nematode Caenorhabditis elegans is the phenomenon of "resistant larvae formation".これは, survival in unfavorable environment, に応respond, して temporary cessation of reproduction, する phenomenon, であり, insect larvae dormancy, similar to している. The purpose of this study is to break the dormancy of C. elegans The structure is clear and the insects are common and important.そこでThis study analyzes the では, まず, and resistant larvae that break the movement before and after the larvae break. The C.elegans egg plate method is used to prepare a large amount of food, and the food (coliform bacteria) is in a dry state and is placed in a state where the resistant larvae are formed. The first time, the part of the resistant larvae is the bait, the tenth part is the liquid cultivation ground, the movement is the movement, the 1 time, the 3 time is the shaking culture, and the 12 time shaking culture is the line. The nematode is used to modulate the mRNA, and the differential display method is used to control the nematode. Time-specific, period-specific に発 appear するバンドの塩array analysis を行い, C.elegans のゲノムプロジェクトinformation を検SO した. The RACE method is based on the full-length cDNA structure of the original method.さらに、ゲノムDNA structure を presumed した. differential displayによる発 appear パターン analysis results, resistant larvae においては, おおむね缝子発Inhibition of the appearance of the disease, hyperactivity of the resistant larvae breaking out of the disease, and period-specific disease of the disease. This time we will analyze the したクローンのうち, the special に発 appear 1 time later する伝子は, リボゾームタンパクをコードしていたが, スプライシングcontrol に关わるSWAP remains 伝子と connecting するpossibility がshows instigation され, and the interest is deep い.また, 12 hours later, the specific に発appears する伝子は414アミノ acid residue よりなる新码タンパクをコードしていた. It's clear that the sameness is intentional and the function is unclear.

项目成果

河野 強,他: "Molecular cloning of the cDNA derived from the nematode Caenorhabditis elegans encoding the peptide promoting uptake of glutamate" Peptide Chemisrty 1996. 505-508 (1997)

Tsuyoshi Kono 等：“来自线虫秀丽隐杆线虫的 cDNA 的分子克隆，编码促进谷氨酸摄取的肽” Peptide Chemisrty 1996. 505-508 (1997)

河野 強,他: "Structure and activity of a new form of the glutamate transporter of the nematode Caenorhabditis elegans" Biosci.Biotech.Biochem.61. 927-929 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“线虫新形式的谷氨酸转运蛋白的结构和活性”Biosci.Biotech.Biochem.61 (1997)。

河野強,他: "The leech excitatory peptide,a member of the GGNG peptide family:Isolation and comparison with the earthworm GGNG peptides" FEBS lett.410. 437-442 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“水蛭兴奋性肽，GGNG 肽家族的成员：与蚯蚓 GGNG 肽的分离和比较”FEBS lett.437-442 (1997)。

河野強,他: "A new type of pheromone biosynthesis activating neuropeptide of the silkworm Bombyx mori" Biosci.Biotech.Biochem.61. 1745-1747 (1997)

Tsuyoshi Kono 等人：“一种新型的家蚕信息素生物合成激活神经肽”Biosci.Biotech.Biochem.61 1745-1747 (1997)。