シナプス小胞の開口分泌に関与する新しい分子のクローニングと機能の解析

突触小泡胞吐作用新分子的克隆及功能分析

• 批准号: 09770015
• 负责人: 森川 吉博
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770015/
• 关键词: サイトカイン; SNAP-23; 尿細管上皮; 肝細胞; 増殖; 分化; 細胞膜; 抗体; 造血; シナプス; クローニング; 開口分泌; シグナル伝達

我々はIL-3/GM-CSF/IL-5のレセプター系でのシグナル伝達をより詳細に解析するためにmRNA differential display 法を用いてIL-3、GM-CSF、IL-5などで誘導される遺伝子を探索したところ、SNAP-23(synaptosome-associated protein of 23 kDa)のマウスホモログの遺伝子断片をクローニングした。SNAP-23遺伝子はIL-3、GM-CSF、IL-5のみならずIL-2やIL-10、LIF、SCF、EPO、G-CSFなどいろいろなサイトカインの刺激により種々の造血系の細胞において誘導された。また、種々の臓器でのSNAP-23 mRNAの発現状況をtissue blotにより検索した結果、脳と精巣ではその発現が非常に弱かったものの、心、肺、肝、腎など種々の臓器において広範に発現していた。そこで今回、種々の臓器で発現していたSNAP-23がいかなる細胞に発現しているのかをin situ hybridization法、および免疫組織染色法、免疫電顕法により検討した。1. tissue blotにてSNAP-23 mRNAの発現量の多かった肝、腎においてin situ hybridization法を行ったところ、肝では肝細胞に、腎では尿細管上皮にシグナルを認めた。2. SNAP-23のC末端のペプチドを用いて抗SNAP-23ポリクロナール抗体を作成し、免疫組織染色を行ったところ、肝細胞および腎尿細管上皮の細胞膜に強いシグナルを認めた。3. 免疫電顕によりこれらのシグナルは主に細胞膜に認められた。現在、その他の臓器においていかなる細胞がSNAP-23を発現しているか検討中である.

々はIL-3/GM-CSF/IL-5のレセプターSystem でのシグナル伝达をよりDetailed analysisするためにmRNA differential display Method: Use IL-3, GM-CSF, IL-5 to induce SNAP-23 (synaptosome-associated protein of 23) kDa)のマウスホモログの伝子片をクローニングした. SNAP-23缝子はIL-3、GM-CSF、IL-5のみならずIL-2やIL-10、LIF、SC F. EPO, G-CSF stimulates hematopoietic cells and induces them. The current situation of SNAP-23 mRNA in this plant is tissue The result of blot is very weak and the result is very weak.ものの、heart、lungs、liver、kidneyなどkind々の燓器において広法に発appearsしていた. SNAP-23 がいかなるcell に発appears in situ hybridization method, immunohistochemistry staining method, and immunofluorescence method. 1. tissue blot SNAP-23 mRNA is present in the liver and kidney in situ The hybridization method is used for the operation of the liver, the liver cells, and the kidneys and the urinary tubule epithelium. 2. SNAP-23's C-terminal C-terminal probe was prepared using the anti-SNAP-23 probe's anti-SNAP-23 probe antibody. Immunohistochemical staining was performed and the liver cells were detected and the renal and urinary tubule epithelial cell membranes were detected. 3. Immunoelectronic immune cells are used to detect the cell membrane. Now, the SNAP-23 SNAP-23 cell is now in use.

项目成果

Morikawa Y: "Inductionofsynaptosomal-associatedprotein-23kD(SNAP-23)by various cytokines" Blood. 92,1. 129-135 (1998)

Morikawa Y：“各种细胞因子诱导突触体相关蛋白 23kD (SNAP-23)”血液。