肝星細胞から肝実質細胞へのレチノイド移送

类维生素A从肝星状细胞转移至肝实质细胞

• 批准号: 09770014
• 负责人: 池田 一雄
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770014/
• 关键词: 肝星細胞; プリオン; レチノイド

正常の肝星細胞は,レチノイドを細胞質内に豊富に蓄えているが,星細胞の活性化とともにレチノイドが放出されることが知られている。さらに,レチノイドが肝線維化の発生,進展を抑制することや,筋線維芽細胞様に形質転換した細胞を再び星細胞様の形状に戻すことが報告され,レチノイドが星細胞の活性化や,肝線維化と深く関わっていることが明らかとなってきている。そこで,今回,レチノイドを放出した活性化星細胞とレチノイドを豊富に蓄えた正常星細胞において,どのような遺伝子発現の差異が認められるかを検討した。ラット培養星細胞を用い,Suppression subtraction hybridization法を行ったところ活性化星細胞に特異的に発現する13の scquenceを得た。その内訳は,活性化星細胞で既にその発現が知られているα-SMA,laminin β,entactin,oxidatitive LDL receptorの遺伝子4個,未知遺伝子が4個,残る5個は星細胞に発現することが報告されていない既知遺伝子であった。第3番目のグループのひとつが,ラットプリオン遺伝子の421bp-837bpに一致した。このcDNAをプローブとし,ノーザンブロットを行ったところ,分離直後の星細胞には,プリオン遺伝子の発現は認められなかったが,分離3日目より発現が確認でき,培養時間に依存して発現が増強し,14日目にピークに達した。In vivoにおけるプリオン遺伝子の発現を,四塩化炭素障害肝で確認したところ,線維性隔壁に沿って,プリオン陽性細胞が認められた。さらに蛋白レベルでの発現を,ウエスタンブロットで確認すると,分離直後の星細胞にはプリオン蛋白の発現は認められず,培養時間に依存して発現が増強し,7〜14日にピークとなった。In vivoにおけるプリオン蛋白の発現は,四塩化炭素障害肝での線維性隔壁,胆管結紮障害肝での門脈領域,中間帯の類洞壁に強く認められた。また、免疫電顕による観察では,星細胞の細胞膜にプリオン蛋白の発現が確認された。以上,プリオン遺伝子ならびに蛋白の発現が,星細胞の活性化に伴って増強することが,明らかとなった。

Normal hepatic stellate cells are rich in cytoplasm, and the activation and release of stellate cells are known. In addition, the development and progress of liver maintenance are inhibited. In addition, the shape of muscle cell and astrocyte is changed. In addition, the shape of astrocyte is changed. In addition, the activation of astrocyte and the development and progress of liver maintenance are deeply related to the development and progress of liver maintenance. The differences in the development of activated astrocytes, astrocytes, and normal astrocytes are discussed. The Suppression subtraction hybridization method was used to detect the activity of astrocytes. 4 α-SMA,laminin β,entactin and oxidotitive LDL receptor genes, 4 unknown genes and 5 residual genes were detected in activated astrocytes. The third part of the text contains 421bp-837bp. The cDNA was isolated from astrocytes, and the expression of the cDNA was confirmed after 3 days of isolation. The expression of the cDNA increased with the culture time, and reached 14 days after isolation. In vivo, the development of positive cells was confirmed by the presence of tetravalent carbon in the liver, and the presence of positive cells in the linear partition was confirmed. After isolation, the protein expression of astrocytes increased depending on the culture time, and the protein expression was confirmed from 7 to 14 days. In vivo, the protein production is reversed, the linear partition of the liver is blocked by carbon tetrahydrate, the portal vein area of the liver is blocked by bile duct ligation, and the wall of the middle zone is blocked by carbon tetrahydrate. The expression of protein in astrocyte membrane was confirmed by immunoelectroporation. As mentioned above, the development of protein and the activation of astrocytes are accompanied by the increase of protein and protein.

项目成果

Kazuo Ikeda et al.: "Expression of Cellular Prion Protein in Activated Hepatic Stellate Cells" American Journal of Pathology. 153. 1695-1700 (1998)

Kazuo Ikeda 等人：“激活的肝星状细胞中细胞朊病毒蛋白的表达”美国病理学杂志。

谷川久一: "肝類洞壁細胞の進歩第10巻" 国際医書出版, 163 (1997)

谷川久一：“肝窦壁细胞的进展第 10 卷”Kokusai Isho Publishing，163（1997）

E.Wisse: "Cells of the Hepatic Sinusoid volum6" The Kupffer Cell Foundation, 502 (1997)

E.Wisse：“肝正弦细胞第 6 卷”库普弗细胞基金会，502 (1997)

Norifumi Kawada,Kazuo Ikeda et al.: "Expression of cyclin D1,D2 and E correlates with proliferation of rat stellate cells in culture" Journal of Hepatology. 30. (1999)

Norifumi Kawada、Kazuo Ikeda 等人：“细胞周期蛋白 D1、D2 和 E 的表达与培养物中大鼠星状细胞的增殖相关”《肝脏病学杂志》。