ShRNAライブラリーを用いた肝線維化,癌化関連因子の網羅的解析と治療への応用

利用ShRNA文库综合分析肝纤维化及癌变相关因素及其在治疗中的应用

• 批准号: 18659393
• 负责人: 池田 一雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659393/
• 关键词: 肝線維化; 肝星細胞; コラーゲン; 低分子RNA; Cre-loP

近年のゲノム・トランスクリプトーム解析により,蛋白質をコードしていないと考えられる非翻訳性RNA(non-codingRNA)のなかに,転写・翻訳レベルで遺伝子発現を制御している低分子RNAが存在していることがわかってきた。そこで我々は,肝星細胞の活性化,及び肝線維化において低分子RNAが重要な役割を演じているかどうか検討するため,ヒトの培養星細胞(LX2)をTGFβ1で刺激することにより変化する低分子RNAとラット肝星細胞の初代培養における低分子RNAの発現変化を調べた。活性化星細胞のCollagen1A1の発現は,TGFβ1により調節されていることが知られている.ヒト星細胞株LX-2を用いた実験では,数種類の低分子RNAがTGFβ1で刺激した際に,Collagen1A1と同様,発現が上昇することが明らかとなった。同時にラット肝星細胞でも同じ数種類の低分子RNAの発現が変動した。そこで,それらの低分子RNAが制御している可能性のあるmRNAをSangerのデータベースより検索すると,そのうちの一つがCollagen5A2,Collagen5A3,FGF1に対して相補的な配列を持つことがわかった。V型コラーゲンは、I型コラーゲンと共に線維を形成しているので,これがV型コラーゲンを制御し,線維化でみられる星細胞によるI型コラーゲンの産生に影響を与えていることが考えられる。星細胞だけでなく,血中の線維芽細胞も肝線維化に関わることがわかってきているので,この低分子RNAによって制御されたFGF1によりそれらが活性化されて肝線維化に影響を与えることも考えられる。現在,数種類の低分子RNAをin vivoモデルで強制発現させるためのウイルスベクターを作製する準備に入り,Cre-loxPシステムとcollagen promoterを用いて活性化星細胞にのみ特異的に発現させるためのベクターを完成させた。これらを用いて,胆管結紮モデルや四塩化炭素肝障害による肝線維化モデルでの低分子RNAの機能を明らかにする予定である。

In recent years, low molecular weight RNA has been found in the analysis of protein and non-coding RNA, and in the control of gene expression. The activation of hepatic stellate cells and the development of low molecular RNA in primary culture of hepatic stellate cells (LX2) are regulated by TGFβ1. The expression of Collagen 1A1 in activated astrocytes is regulated by TGFβ1. When LX-2 cells were stimulated with TGFβ1,Collagen 1A1 and Collagen 1A1 showed an increase in expression. At the same time, the development of several kinds of low molecular RNA in liver stellate cells has changed. In addition, there is a possibility that LMRNA can be controlled by a combination of Collagen 5A2,Collagen 5A3 and FGF1. The V-type and I-type tubes are controlled by the same linear dimension, and the I-type tubes are controlled by the same linear dimension. Star cells, blood cells and vascular buds are involved in liver maintenance, and low molecular RNA is used to control FGF1. Now, several kinds of low-molecular RNA in vivo are ready for stress development,cre-loxP system and collagen promoter are used to activate astrocytes for specific development. The function of low molecular RNA in liver maintenance is clearly defined by the use of bile duct ligation and tetra-carbon liver damage.

项目成果

Genipin suppression of fibrogenic behaviors of the alpha-TN4 lens epithelial cell line.

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of cataract and refractive surgery
• 影响因子: 2.8
• 作者: A. Kitano;S. Saika;O. Yamanaka;P. Reinach;K. Ikeda;Y. Okada;K. Shirai;Y. Ohnishi

Expression of large tenascin-C splice variants by hepatic stellate cells/myofibroblasts in chronic hepatitis C

• DOI: 10.1016/j.jhep.2006.10.011
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: JOURNAL OF HEPATOLOGY
• 影响因子: 25.7
• 作者: El-Karef, Amro;Kaito, Masahiko;Yoshida, Toshimichi
• 通讯作者: Yoshida, Toshimichi

Adenovirus-mediated expression of BMP-7 suppresses the development of liver fibrosis in rats

• DOI: 10.1136/gut.2006.092460
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: GUT
• 影响因子: 24.5
• 作者: Kinoshita, Kohji;Iimuro, Yuji;Ikeda, Kazuo
• 通讯作者: Ikeda, Kazuo

Spatial and temporal control of laminin-332 (5) and -511 (10) expression during induction of anagen hair growth.

在毛发生长初期诱导过程中层粘连蛋白 332 (5) 和 -511 (10) 表达的空间和时间控制。

• DOI: 10.1369/jhc.6a6920.2006
• 发表时间: 2007
• 期刊: The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society
• 作者: Sugawara,Koji;Tsuruta,Daisuke;Kobayashi,Hiromi;Ikeda,Kazuo;Hopkinson,SusanB;Jones,JonathanCR;Ishii,Masamitsu
• 通讯作者: Ishii,Masamitsu

Erythrophagocytosis by liver macrophages (Kupffer cells) promotes oxidative stress, inflammation, and fibrosis in a rabbit model of steatohepatitis - Implications for the pathogenesis of human nonalcoholic steatohepatitis

• DOI: 10.2353/ajpath.2007.060441
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 6
• 作者: Otogawa, Kohji;Kinoshita, Kohji;Kawada, Norifumi
• 通讯作者: Kawada, Norifumi