強皮症線維芽細胞におけるコラーゲン遺伝子転写活性化責任領域の解明

阐明硬皮病成纤维细胞中负责胶原基因转录激活的区域

• 批准号: 09770610
• 负责人: 玉木 毅
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Research Institute, International Medical Center of Japan (1998)The University of Tokyo (1997)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770610/
• 关键词: 汎発生強皮症; コラーゲン; 転写調節; 線維芽細胞; NF-kB; 汎発性強皮症; NF-κB

昨年度コラーゲンa2鎖のプロモーター領域を有するCATプラスミド(COL1A2-CAT)及びその切断変異を強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞にtransfectして強皮症線維芽細胞におけるプロモーター活性化が消失する領域の同定を試みたが、各実験間および強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞間のtransfectionの効率のばらつきが大きく、transfectionの効率を全体的に上昇させる目的でlipofectinを用いた高効率の方法に切り替えて同様の検討を行なった。これによりtransfectionの効率は全体に上昇したものの、結局結果のばらつきは避けられなかった。したがってdeletion analysisのみによりプロモーター上の責任領域を同定することには限界があると思われ、他のassay系により関与する転写因子をある程度絞り込んだ上でsite-specific mutantの作成による検討を行なわねば安定した結果を得ることは困難ではないかと考えられた。しかし、この方向の検討も関与する転写因子が全く未知のものである場合には無効であり、さらに多様な方向からの検討が必要と思われる。また昨年度、強皮症線維芽細胞の核抽出液において正常に比してより強いNF-kB consensussequenceへの結合能が認められた。そこで、コラーゲンa2鎖プロモーター領域上でNF-kBconsensus sequenceと類似の配列を検索したが、通常のstringencyでの検索では本研究で検討している配列上にはconsensus sequence類似の配列が存在しなかった。consensusの配列が存在しなくても実際には結合する可能性はあり、NF-kBを直接コラーゲンa2鎖プロモーターのoligonucleotideに結合させて検討することを計画している。

Last year's CAT program was launched in the field of computer science.(COL1A2-CAT) and the rate of transfection between scleroderma line and normal line in vitro between scleroderma line and normal line. Transfection efficiency increases overall. Lipofectin is used to improve efficiency. The efficiency of this kind of transfections is rising all the time, and the result is avoiding them. The scope of responsibility for deletion analysis is the same as that for other assay systems. For example, if the search engine is not fully operational, the search engine is not fully operational. Also last year, the binding energy of NF-kB consensus was found to be stronger than normal in nuclear extracts of scleroderma germ cells. NF-kB consensus sequence and similar alignment patterns exist in the domain of NF-kB consensus sequence. The alignment of consensus exists, and the possibility of binding is discussed. The NF-kB is directly linked to the oligonucleotide.

项目成果

Fujimoto M, et al.: "Prevalence and clinical relevance of 52-kDa and 60-kDa Ro/SS-A auroantibodies in Japanese patients with systemic sclerosis" Annals of the Rheumatic Diseases. 56. 667-670 (1997)

Fujimoto M 等人：“日本系统性硬化症患者中 52-kDa 和 60-kDa Ro/SS-A 金抗体的患病率和临床相关性”风湿病年鉴。

Fujimoto M, et al.: "Distribution of anti-p80-coilin autoantibody in collagen diseases and various skin diseases" British Journal of Dermatology. 137. 916-920 (1997)

Fujimoto M 等人：“抗 p80-coilin 自身抗体在胶原病和各种皮肤病中的分布”英国皮肤病学杂志。