強皮症線維芽細胞におけるコラーゲン遺伝子転写活性化機構へのサイトカインの関与

ヒト正常線維芽細胞におけるinterleukin-6のコラーゲン遺伝子転写活性化についてシスエレメントのマッピングを目的に実験条件等について検討を重ねたが、TGF-βに比して活性化の程度が低いことが最終的な障害となり、再現性のある安定した結果を得ることが困難であった。一方、IL-6と類似構造を有し、IL-6以上にコラーゲン遺伝子の転写を活性化する可能性が示唆されているoncostatin Mについての検討では、コラーゲン遺伝子の転写活性化作用がIL-6自体よりも強いことを示唆するpreliminaryなデータが得られた。今後はoncostatin Mについてのマッピングに置き換えて検討していく予定である。また、oncostatin Mにおいても有意な転写活性化作用の証明が困難であった場合も考え、強皮症線維芽細胞におけるconstitutiveな転写活性化のresponsive elementを探索するという見地からのアプローチを計画した。予備的な実験として、強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞においていくつかの欠失変異体を用いたプロモーター活性の比較を行ったところ、強皮症線維芽細胞においては正常線維芽細胞に比してコラーゲン遺伝子プロモーターの活性が実際に上昇していることが確認され、さらにその責任領域は-323bpと-108bpの間に存在すると思われた。今後さらに多種類の欠失変異体を用いた比較を繰り返すことにより、責任領域の範囲を特定していくことが必要であると思われる。また、最近この領域内での種々の既知転写因子のコラーゲン遺伝子転写制御への関わりが報告されており、その中には皮膚のみに特異的に発現されるc-kroxなど興味あるものも多い。したがってもう一つのアプローチとして、こうした既知の転写因子の強皮症への関わりを検討していく方向も有用であると思われる。

ヒト正常線維芽細胞におけるinterleukin-6のコラーゲン遺伝子転写活性化についてシスエレメントのマッピングを目的に実験条件等について検討を重ねたが、TGF-βに比して活性化の程度が低いことが最終的な障害となり、再現性のある安定した結果を得ることが困難であった。一方、IL-6と類似構造を有し、IL-6以上にコラーゲン遺伝子の転写を活性化する可能性が示唆されているoncostatin Mについての検討では、コラーゲン遺伝子の転写活性化作用がIL-6自体よりも強いことを示唆するpreliminaryなデータが得られた。今後はoncostatin Mについてのマッピングに置き換えて検討していく予定である。また、oncostatin Mにおいても有意な転写活性化作用の証明が困難であった場合も考え、強皮症線維芽細胞におけるconstitutiveな転写活性化のresponsive elementを探索するという見地からのアプローチを計画した。予備的な実験として、強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞においていくつかの欠失変異体を用いたプロモーター活性の比較を行ったところ、強皮症線維芽細胞においては正常線維芽細胞に比してコラーゲン遺伝子プロモーターの活性が実際に上昇していることが確認され、さらにその責任領域は-323bpと-108bpの間に存在すると思われた。今後さらに多種類の欠失変異体を用いた比較を繰り返すことにより、責任領域の範囲を特定していくことが必要であると思われる。また、最近この領域内での種々の既知転写因子のコラーゲン遺伝子転写制御への関わりが報告されており、その中には皮膚のみに特異的に発現されるc-kroxなど興味あるものも多い。したがってもう一つのアプローチとして、こうした既知の転写因子の強皮症への関わりを検討していく方向も有用であると思われる。