黄色腫血管内皮細胞接着分子発現へのNF_KBの関与

NF_KB参与黄瘤内皮细胞粘附分子表达

• 批准号: 09770638
• 负责人: 三好 研
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770638/
• 关键词: 黄色腫; NF_KB; 血管内皮細胞; NFκB; LDL; ゲルシフトアッセイ法

黄色腫組織での泡沫細胞のリクルートに際して、血管外に漏出し黄色腫組織内で酸化的修飾を受けたLDLが、血管内皮細胞内で転写調節因子NFκBを活性化することを示し、m-LDLによる血管内皮細胞での白血球接着分子(VCAM-1やELAM-1)の誘導がNFκBの活性化を介して生じる可能性が示唆された。(平成9年度)本年度は、この酸化LDLによるNFκBの活性化にプロテアーゼ、プロテインキナーゼCあるいはチロシンキナーゼが関与しているかを否かを検討した。高コレステロール血症ウサギ背部にデキストラン硫酸を皮内注射して、実験的黄色腫を作成し、ヒト血清から分離した低比重リポ蛋白(LDL)を実験的黄色腫と1昼夜孵置して修飾LDL(m-LDL)を作成した。培養血管内皮細胞をプロテアーゼインヒビター、プロテインキナーゼCインヒビター、チロシンキナーゼインヒビターでそれぞれ前処置後、25μg/mlのm-LDLで30分間刺激した。血管内皮細胞の核蛋白を抽出し、NFκB結合部位を有するオリゴDNAを用いたゲルシフトアッセイ法にてNFκBの活性化を検討した。m-LDLによるNFκBの核内移動を示す特異的なバンドそのものが認められず、プロテアーゼ、プロテインキナーゼC、タイロシンキナーゼの関与を検討することはできなかった。次に、上記インヒビターでそれぞれ前処置後、25μg/mlのm-LDLで5時間刺激した血管内皮細胞におけるVCAM-1、ELAM-1の発現をフローサイトメトリーにて測定した。m-LDLによるVCAM-1、ELAM-1の発現がみとめられず、プロテアーゼ、プロテインキナーゼC、チロシンキナーゼの関与を検討することはできなかった。今後は、m-LDLがNFκBを活性化する条件を充分に検討し、その活性化を調節している過程を明らかにしたい。

The proliferation of foam cells in xanthomas, the leakage of LDL outside the blood vessels and the acidification of LDL in xanthomas, and the activation of the regulatory factor NFκB in vascular endothelial cells have shown that the induction of leukocyte binding molecules (VCAM-1 and ELAM-1) in vascular endothelial cells, such as m-LDL, may be mediated by the activation of NFκB. (Heisei 9) This year, the activation of NFκB in the presence of acidified LDL was investigated. High cholesterol, high cholesterol, low specific gravity protein (LDL), high cholesterol, low cholesterol Cultured vascular endothelial cells were stimulated with 25μg/ml m-LDL for 30 minutes before treatment. Nuclear protein expression in vascular endothelial cells, NFκB binding sites, DNA activation, NFκB activation The nuclear mobility of NFκB in the m-LDL region is characterized by a variety of factors, such as: After treatment with 25μg/ml of m-LDL for 5 days, the expression of VCAM-1 and ELAM-1 in vascular endothelial cells was determined. The development of VCAM-1 and ELAM-1 in m-LDL is discussed in detail. In the future, the conditions for the activation of NFκB in m-LDL will be fully discussed, and the process of activation will be clarified.