MLL遺伝子の特性及び転座相手遺伝子との融合遺伝子による白血病発症機構の解析

1. MLLキメラタンパクの細胞内局在の検討平成9年度はMLL遺伝子の転座相手遺伝子のうち,核に局在するLTG9遺伝子と細胞質に局在するAF6遺伝子とを用いて,MLL-LTG9及びMLL-AR6キメラ遺伝子を発現させることにより,MLLキメラタンパクは転座相手遺伝子産物の性質に関わらず,核に局在することを明らかにした.また,その核局在性には全ての転座に共通するMLLのN端側領域が重要であることをも明らかにして報告した(Joh et al.,Oncogene 15,1681-1687,1997).2. MLL上及びMLLキメラタンパクの機能解析平成10年度はMLL遺伝子の標的遺伝子解明のため,まず,マウス由来の32Dc13細胞を用いて,MLL-LTG9及びMLLのN端側領域(MLL-Zf(-))遺伝子の誘導発現系を作製した.MLL遺伝子ノックアウトマウスの解析において,脊椎骨でHox遺伝子群の発現異常が報告されている.そこで,今回作製した誘導発現系を用いて,Hox遺伝子群の発現について検討した.MLL-LTG9及びMLL-Zf(-)遺伝子を発現誘導すると,Hox a7,Hox b7,Hox c9遺伝子の発現低下が認められた(Joh et al.,Oncogene 18,1125-1130,1999).Hox遺伝子には体節形成のみならず,血液細胞の発生・分化を制御する働きもあることから,MLLキメラタンパクが細胞核内に局在し,正常MLLタンパクの機能をdominant negativeに抑制することによりHox遺伝子群の発現異常をもたらし,その結果,血液細胞の正常な発生・分化が妨げられ,白血病化に働いている可能性が考えられる.更に,この誘導発現系を用いて,RAP-PCR Differential Display法により,いくつかのMLL遺伝子の標的遺伝子候補を得ており,現在解析中である.

1. MLLキメラタンパクの細胞内局在の検討平成9年度はMLL遺伝子の転座相手遺伝子のうち,核に局在するLTG9遺伝子と細胞質に局在するAF6遺伝子とを用いて,MLL-LTG9及びMLL-AR6キメラ遺伝子を発現させることにより,MLLキメラタンパクは転座相手遺伝子産物の性質に関わらず,核に局在することを明らかにした.また,その核局在性には全ての転座に共通するMLLのN端側領域が重要であることをも明らかにして報告した(Joh et al.,Oncogene 15,1681-1687,1997).2. MLL上及びMLLキメラタンパクの機能解析平成10年度はMLL遺伝子の標的遺伝子解明のため,まず,マウス由来の32Dc13細胞を用いて,MLL-LTG9及びMLLのN端側領域(MLL-Zf(-))遺伝子の誘導発現系を作製した.MLL遺伝子ノックアウトマウスの解析において,脊椎骨でHox遺伝子群の発現異常が報告されている.そこで,今回作製した誘導発現系を用いて,Hox遺伝子群の発現について検討した.MLL-LTG9及びMLL-Zf(-)遺伝子を発現誘導すると,Hox a7,Hox b7,Hox c9遺伝子の発現低下が認められた(Joh et al.,Oncogene 18,1125-1130,1999).Hox遺伝子には体節形成のみならず,血液細胞の発生・分化を制御する働きもあることから,MLLキメラタンパクが細胞核内に局在し,正常MLLタンパクの機能をdominant negativeに抑制することによりHox遺伝子群の発現異常をもたらし,その結果,血液細胞の正常な発生・分化が妨げられ,白血病化に働いている可能性が考えられる.更に,この誘導発現系を用いて,RAP-PCR Differential Display法により,いくつかのMLL遺伝子の標的遺伝子候補を得ており,現在解析中である.