KDR、flt-1遺伝子導入ラットにおけるメサンギウム増殖性腎炎の作製とその治療に関する研究

1) すでにクローニングされているラットflt-1,KDRのシークエンスを検討し、その上流域にβ-galactosidase活性を組み込んだcDNAを合成した。市販のcationic liposomeとこのcDNAを反応させ、混合物を作製した2) cationic liposome-cDNA混合物を注入後、ラットを閉腹し、12時間後、24時間後、2日後、3日後、4日後、1週間後にラットより、腎臓、肝臓、肺を摘出し、凍結切片を用いて、β-galactosidase活性の免疫染色を行い、切片あたり陽性糸球体数を数え、導入効率を算定した。3) 導入効率が安定したとろで、導入、非導入ラットで、病期に応じて尿蛋白、BUN.Crを測定し、腎 臓を摘出し病理学的検討を加えた。4) 遺伝子導入・非導入ラット間で、尿蛋白、BUN.Cr、組織学的に有意差は認めなかった。5) そこで、遺伝子・非導入ラットの両方にVEGFを経静脈的に投与したところ、導入ラットにおいて、増殖病変が強い傾向がみとめられた。現在さらにVEGF投与量、回数糖の実験条件をふやし、実験を継続中である。6) 加えて、導入、非導入ラットにThy-1腎炎を惹起し、双方の臨床病理学的比較検討を進めている。

1) すでにクローニングされているラットflt-1,KDRのシークエンスを検討し、その上流域にβ-galactosidase活性を組み込んだcDNAを合成した。市販のcationic liposomeとこのcDNAを反応させ、混合物を作製した2) cationic liposome-cDNA混合物を注入後、ラットを閉腹し、12時間後、24時間後、2日後、3日後、4日後、1週間後にラットより、腎臓、肝臓、肺を摘出し、凍結切片を用いて、β-galactosidase活性の免疫染色を行い、切片あたり陽性糸球体数を数え、導入効率を算定した。3) 導入効率が安定したとろで、導入、非導入ラットで、病期に応じて尿蛋白、BUN.Crを測定し、腎 臓を摘出し病理学的検討を加えた。4) 遺伝子導入・非導入ラット間で、尿蛋白、BUN.Cr、組織学的に有意差は認めなかった。5) そこで、遺伝子・非導入ラットの両方にVEGFを経静脈的に投与したところ、導入ラットにおいて、増殖病変が強い傾向がみとめられた。現在さらにVEGF投与量、回数糖の実験条件をふやし、実験を継続中である。6) 加えて、導入、非導入ラットにThy-1腎炎を惹起し、双方の臨床病理学的比較検討を進めている。