放射線抵抗性悪性脳腫瘍に対する定位放射線治療時の副作用軽減に関する基礎的研究

抗放射恶性脑肿瘤立体定向放疗减少副作用的基础研究

• 批准号: 09771046
• 负责人: 岩永 充人
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771046/
• 关键词: glioblastoma; radiation; グルタチオン; γ-GCS; NF-κB; レドクス制禦

(方法及び結果)対象;ヒト神経芽腫細胞株(NB9,IMR32)及びヒト悪性神経膠芽腫細胞株(T98G,A172)放射線照射による細胞障害の定量;MTTassayによる検討ではT98G,A172においてNB9,IMR32に比し顕著な放射線抵抗性を示した。T98G,A172両者間では有意にT98Gにおいて放射線抵抗性を示した。放射線による抗酸化酵素の誘導とその定量;GSHの細胞内濃度は定常状態で放射線抵抗性と正比例し、T98GではNB9に比し実に14倍の濃度であった。照射により細胞内GSH濃度、GSH合成の律速酵素であるγ-GCSは上昇し、その上昇に要する線量はNB9では1Gyであるのに対しT98Gでは29Gy以上を要した。これにより細胞内GSHがγ-GCSのレドックス制御に関わっていることが示唆された。γ-GCS遺伝子のプロモーター解析;EMSAにてγ-GCS heavy subnit上流に存在するNF-κBのDNA binding activityを検討した結果、T98Gにおいて20Gy以上の高線量域での上昇をみた。更に細胞内GSHを低下させる前処置にて1Gy程度の低線量にて上昇することを確認した。γ-GCS hevy sobunit上流のluciferase assayではNF-κB bunding siteのdeletion,mutationによりプロモーター活性は失われた。以上により放射線によるNF-κBを介したγ-GCS誘導、更にNF-κBのDNAbindingは細胞内GSHにより負の制御を受けていることが示唆された。(まとめ)悪性神経膠芽腫細胞株において、細胞内GSH(グルタチオン)濃度および照射後のγ-GCS(グルタチオン合成の律速酵素)の遺伝子誘導ならびに活性上昇を介したGSH合成増加が放射性抵抗性獲得において重要な働きを担っている事、更に細胞内GSHが放射線により誘導される転写因子NF-κBのレドックス制御に深く関わっていることを明らかにした。

(methods and results) NB9,IMR32 and T98GMAL A172 were irradiated with radiation to quantify the cytopathic damage, and the radioresistance of MTTassay was detected by radioimmunoassay. People with T98GMAG A172 are interested in demonstrating radiation line resistance in T98G. The concentration of anti-acidifying enzymes was quantified by radioactivity, the intracellular temperature of GSH was constant, and the positive proportion of radiation line resistance was 14 times higher than that of T98G, T98G and NB9. Exposure to intracellular GSH, GSH synthesis, tachyzyme, γ-GCS, NB9, 1Gy, T98G, 29Gy and so on. The intracellular GSH, gamma-GCS, gamma-ray, and so on, are known to have been implicated. The analysis of γ-GCS subsets is not valid; the results of NF- κ B DNA binding activity downstreams exist in the upstream of γ-GCS heavy subnit, and that of T98G is higher than 20Gy in the high line domain. The intracellular GSH level is low, the 1Gy level is low, the intracellular 1Gy level is low, the intracellular DNA level is low, and the intracellular DNA level is low. Gamma-GCS hevy sobunit upstream "luciferase assay", "NF- κ B", "bunding site", "deletion,mutation", "low activity", "loss of activity". The above radiation response (NF- κ B) induces gamma-GCS guidance, and NF- κ B (DNAbinding) induces intracellular GSH signaling. The activity of gamma-GCS (synthesis of tachyzymes) induced by irradiation of γ-GCS (synthesis of tachyzymes) and the activity of induction of GSH synthesis plus radioresistance are very important for the development of radiation resistance. More importantly, the intracellular GSH radiation radiation leads to the writing factor NF- κ B, which is responsible for the control and control of the intracellular radiation.