Trk導入髄芽腫細胞株のNGF誘導細胞死モデルにおけるapoptosis機構解明

阐明 Trk 导入的髓母细胞瘤细胞系 NGF 诱导的细胞死亡模型中的凋亡机制

• 批准号: 09771064
• 负责人: 村垣 善浩
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771064/
• 关键词: アポトーシス; 分化; 神経成長因子; 髄芽腫; Trk; p75; シグナル伝達

これまでの研究で、髄芽腫細胞株のD283に神経成長因子(NGF)の受容体であるTrkを遺伝子導入したD283trkが、NGFにより細胞死(アポトーシス)を起こすことを示してきた。今回その再現性をみるため、同一患者から得られたD425(原発巣)とD458(播種した細胞から)細胞株に同様にtrkA mRNAを導入した。この高発現細胞(D425trk,D458trk)にNGFを添加すると、D425trkはD283trkと同様短期間でapoptosisが誘導されたが、D458trkは長期間のNGFの添加により、分化が誘導されることを示した。このD425trkとD458trkの分子機構の違いを時系列で詳しく検討した。Northen blottingを用い、NGF添加前と12時間、24時間、72時間後のD425,D425trk,D458,D458trk細胞のRNAで比較した。NGF添加12時間後でtrk細胞はすでにtrkAをupregulateしており、時間経過とともにその発現量を増していた。また他のNGF receptorであるp75NGFRはD458trkにおいて72時間後に発現してきたが、他の細胞には発現していなかった。またp75NGFR蛋白の発現は免疫染色で見たところ、一週間後にはっきり発現が認められた。今回の実験により、各細胞間での発現の違いだけでなく、時間経過でtrkA,p75NGFRの発現のパターンを示すことができた。

In this study, the D283 cell line was introduced into the receptor of NGF, and NGF was introduced into the receptor. The same trkA mRNA was introduced into D425(original) and D458(seeded) cell lines from the same patient. The high expression cells (D425trk, D458trk) were induced by NGF addition, D425trk by apoptosis in the short term, and D458trk by NGF addition and differentiation in the long term. The molecular mechanism of D425trk and D458trk is discussed in detail. RNA in D425,D425trk,D458,D458trk cells was compared at 12, 24, and 72 hours after Northen blotting and NGF addition. 12 hours after NGF was added, trk cells upregulated and the amount of trkA emitted increased. His NGF receptor p75NGFR was found after 72 hours on D458trk, and his cells were found after 72 hours on D458trk. p75NGFR protein was detected by immunostaining, and was detected after a week. Now the time has passed, and the occurrence of NGFR has been shown.

项目成果

村垣善浩, その他3名: "TrkA受容体を発現させた同一患者由来髄芽腫細胞株が、神経成長因子により分化と細胞死を示した。" 第6回日本脳腫瘍カンファレンス抄録集. 65 (1997)

Yoshihiro Muragaki 等 3 人：“来自同一患者的表达 TrkA 受体的髓母细胞瘤细胞系在神经生长因子的作用下表现出分化和细胞死亡。”第 6 届日本脑肿瘤会议论文集（1997 年）。

村垣善浩.久保長生 堀智勝: "Photon Radiosurgery system" 脳神経外科の最先端. (1999)

Yoshihiro Muragaki、Nagao Kubo、Tomokatsu Hori：“光子放射外科系统”神经外科的前沿（1999）。