モルモットにおける発生工学技術の開発

豚鼠发育工程技术进展

• 批准号: 09771318
• 负责人: 鈴木 治
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771318/
• 关键词: モルモット; 胚幹細胞; 発生工学

モルモットの発生工学的応用を図るため、モルモットにおける遺伝子標的破壊動物を作成する際に必須となる胚幹細胞(ES細胞)の作成を試みた。マウスにおけるES細胞の樹立は、胚盤胞の内部細胞塊(ICM)由来の細胞がフィーダ細胞と共培養することによりなされるが、これまでの観察からモルモット胚の体外培養下でのハッチング様式はマウスと異なり、栄養芽細胞の突出および増殖が顕著でICMが透明帯から脱出しない。さらに、発生学上マウスで見られる胎盤外円錐形成に伴うICMの栄養膜外胚葉からの脱出がモルモットにはないという特徴がある。そこで、Fub:Hartley系モルモットの交配により胚盤胞を採取し、A)無処理の胚盤胞(n=5)、B)低pH処理(Acidic Tyrode液)により、透明帯を除去した胚盤胞(n=6)、およびC)透明帯除去し、さらに界面活性剤(Triton-X)処理により栄養芽細胞を除去した胚盤胞(n=15)の3実験区を用意した。A区では、予想通りフィーダ細胞に付着するものの栄養膜外胚葉の増殖だけが顕著に見られ、ICMは透明帯内にとどまったまま出てこなかった。B区においても栄養膜外胚葉の増殖し、多層性の球状構造を形成するのみで、ES細胞に特徴的な細胞集団は出現しなかった。C区の場合は、界面活性剤処理により死んだ例も3例あったものの、非常に凝集した細胞集団が初期に観察された。しかし、継代の後、多層性の球状構造が主体となり最終的にはB区と同じ状態となった。結果的にどの実験区でもES細胞の樹立はできなかったが、胚盤胞の体外培養での挙動がマウスとは非常に異なることがわかった。おそらく単離ICMを用いる必要がある点が特徴的といえよう。さらにフィーダ細胞の選別やサイトカインの利用を考える必要があろう。

The development of embryonic stem cells (ES cells) is necessary for the production of embryonic stem cells (ES cells) for the development of embryonic stem cells. In vitro culture of ES cells, the cells from which the blastoderm cells originated were observed to be derived from the inner cell mass (ICM) of the blastoderm. In addition, the characteristics of placenta ectopia cone formation accompanied by ICM ectopia embryo detachment are also observed in biology. A) No treatment of blastoderm cells (n=5) B) Low pH treatment (Acidic Tyrode solution) C) Clear zone removal C) Clear zone removal C) Interface active agent (Triton-X) treatment D) No treatment of blastoderm cells (n=15) A region, to understand the cell to pay for the development of the membrane ectoblast, see, ICM transparent zone, to send out the The cell clusters characteristic of ES cells appeared in the B region due to the formation of multi-layered spherical structures and the growth of ectodermal leaves. In the case of zone C, the interfacial activity was detected in the initial stage of cell aggregation. The main body of the multi-layered spherical structure is the same state as the B region. As a result, ES cells were established in vitro and blastoderm cells were cultured in vitro.おそらく単离ICMを用いる必要がある点が特徴的といえよう。The selection and utilization of cells are necessary.

项目成果

O.Suzuki、他3名: "Artificial manipulation of ovulation and oocyte maturation in mice and guinea pigs" Reproductive Biology Update(雑誌ではなくレビュー本). 403-414 (1997)

O.Suzuki 和其他 3 人：“小鼠和豚鼠排卵和卵母细胞成熟的人工操作”生殖生物学更新（评论书，不是杂志）403-414（1997）。