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モルモットにおける発生工学技術の開発

豚鼠发育工程技术进展

基本信息

批准号：
09771318
负责人：
鈴木治
金额：
$ 1.34万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771318/
关键词：
モルモット胚幹細胞発生工学

项目摘要

モルモットの発生工学的応用を図るため、モルモットにおける遺伝子標的破壊動物を作成する際に必須となる胚幹細胞(ES細胞)の作成を試みた。マウスにおけるES細胞の樹立は、胚盤胞の内部細胞塊(ICM)由来の細胞がフィーダ細胞と共培養することによりなされるが、これまでの観察からモルモット胚の体外培養下でのハッチング様式はマウスと異なり、栄養芽細胞の突出および増殖が顕著でICMが透明帯から脱出しない。さらに、発生学上マウスで見られる胎盤外円錐形成に伴うICMの栄養膜外胚葉からの脱出がモルモットにはないという特徴がある。そこで、Fub:Hartley系モルモットの交配により胚盤胞を採取し、A)無処理の胚盤胞(n=5)、B)低pH処理(Acidic Tyrode液)により、透明帯を除去した胚盤胞(n=6)、およびC)透明帯除去し、さらに界面活性剤(Triton-X)処理により栄養芽細胞を除去した胚盤胞(n=15)の3実験区を用意した。A区では、予想通りフィーダ細胞に付着するものの栄養膜外胚葉の増殖だけが顕著に見られ、ICMは透明帯内にとどまったまま出てこなかった。B区においても栄養膜外胚葉の増殖し、多層性の球状構造を形成するのみで、ES細胞に特徴的な細胞集団は出現しなかった。C区の場合は、界面活性剤処理により死んだ例も3例あったものの、非常に凝集した細胞集団が初期に観察された。しかし、継代の後、多層性の球状構造が主体となり最終的にはB区と同じ状態となった。結果的にどの実験区でもES細胞の樹立はできなかったが、胚盤胞の体外培養での挙動がマウスとは非常に異なることがわかった。おそらく単離ICMを用いる必要がある点が特徴的といえよう。さらにフィーダ細胞の選別やサイトカインの利用を考える必要があろう。

It is necessary to make an attempt to use the broken equipment of the hygiene and engineering system to make the ES cell. The origin of the ES cells and the internal cells (ICM) of the embryos is that the cells are co-cultured, and the embryos are cultured in vitro. The embryos are cultured in vitro, the embryos are cultured in vitro, and the buds are protruding from the ICM cells. In terms of physiology and physiology, the formation of the outer part of the fetus is accompanied by ICM, the ectoderm of the membrane, the prolapse of the ectoderm, the prolapse of the fetus, and the formation of the fetus. After mating, Fub: Hartley system, the embryo cells were collected, A) the embryo cells were taken out, B) the low pH cells (Acidic Tyrode solution) were removed, the transparent cells were removed, the interface activity (Triton-X) was removed, the germ cells were removed, and the area 3 of the germ cells (nude 15) was removed. In area A, I would like to know that the epidermis of the membrane, the ectoderm, the epidermis, the epidermis, the ectoderm, the In the B region, the ectoderm of the membrane was formed by the formation of the ectoderm, the globular formation of the polygonum, and the special cell collection of the ES cells. In the C region, there were 3 cases of cell aggregation, cell aggregation and early observation of cell aggregation. After the first generation and the second generation, the multi-sex ball is used to create the same status as the B area of the main body. Results the results showed that the culture of ES cells in vitro and embryo culture in vitro were very important. Use the necessary information to get away from ICM and click on the special location. If you choose to make use of the necessary information, please do not make use of it.