唾液腺アポトーシスにおけるhnRNPAIの機能解析

hnRNPAI在唾液腺细胞凋亡中的功能分析

• 批准号: 09771548
• 负责人: 大西 芳秋
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771548/
• 关键词: 唾液腺腫瘍; アポトーシス; hnRNP A1

これまでの研究結果より、アクチノマイシン-DおよびアドリアマイシンによりHSG細胞に誘発された細胞死は形態学的に、アポトーシス様所見であると示唆されるに至ったが、血球系の細胞に誘発されるような典型的なアポトーシスとは異なるメカニズムにより誘発されていることが示唆された。そこで本研究ではHSG細胞におけるアポトーシス機構の特異性が、トポイソメレース阻害剤によりmRNAの発現量が減少する遺伝子として単離したcDNA、hnRNP A1(RNA結合タンパクの1種であり、SF2と共にpre-mRNAの5'スプライスサイトに結合しスプライシングの調節を行っていると考えられている)の作用によりアポトーシス調節遺伝子の唾液腺特異的なスプライシングに起因しているという仮定のもと、hnRNP A1の発現の変化とアポトーシス調節遺伝子(特にスプライシングの違いにより相反する作用を持っているbcl-x)の発現について焦点を当てて検討していきたいと考えている。本年度は主にアクチノマイシン-DによるHSG細胞のhnRNP A1の発現量の変動等の基礎的データの検討を中心に行った。RT-PCR法によるhnRNP A1の発現量の解析法を確立し、アクチノマイシン-DによるHSG細胞のアポトーシス誘発に伴いhnRNP A1の発現の減少が本方法により観察された。エトポシドやカンプトテシンといったHSG細胞にアポトーシスを誘発しないトポイソメレース阻害剤についてはhnRNP A1発現の減少は観察されなかった。またc-mycやp53については発現の変動は観察されなかった。bcl-2については発現量が非常に低かったためにうまく検出することができなかった。来年度はこれらの点を踏まえてbcl-2の高感度検出法の確立ならびに検討、さらにはbcl-xについても検討していきたい。

こ れ ま で の results よ り, ア ク チ ノ マ イ シ ン -d お よ び ア ド リ ア マ イ シ ン に よ り に HSG cells induced 発 さ れ た cell death は morphology に, ア ポ ト ー シ ス others can see で あ る と in stopping さ れ る に to っ た が, blood cell の に 発 lure さ れ る よ う な typical な ア ポ ト ー シ ス と は different な る メ カ ニ ズ ム に よ り lure Publish されて されて る る とが とが show された. そ こ で this study で は HSG cells に お け る ア ポ ト ー シ ス の specificity が, ト ポ イ ソ メ レ ー ス resistance against tonic に よ り mRNA の 発 now decrease が す る posthumous son 伝 と し て 単 from し た cDNA, hnRNP A1 (rna-binding タ ン パ ク の one で あ り, SF2 と altogether に pre - mRNA の 5 'ス プ ラ イ ス サ イ ト に combining し ス プ ラ イ シ ン グ の line adjustment を っ て い る と exam え ら れ て い る) の role に よ り ア ポ ト ー シ ス adjust heritage 伝 son の salivary gland specific な ス プ ラ イ シ ン グ に cause し て い る と い う 仮 set の も と , hnRNP A1 の 発 の now - the と ア ポ ト ー シ ス adjust heritage 伝 child (especially に ス プ ラ イ シ ン グ の violations い に よ り instead す る role を hold っ て い る BCL - x) の 発 now に つ い て focus を when て て beg し 検 て い き た い と exam え て い る. This year は main に ア ク チ ノ マ イ シ ン -d に よ る HSG cells の hnRNP A1 の 発 amount is の - such as の based デ ー タ の beg を 検 center line に っ た. Rt-pcr method に よ る hnRNP A1 の 発 now を の analytical method established し, ア ク チ ノ マ イ シ ン -d に よ る HSG cells の ア ポ ト ー シ ス 発 lure に with い hnRNP A1 の 発 の reduce が now this method に よ り 観 examine さ れ た. エ ト ポ シ ド や カ ン プ ト テ シ ン と い っ た HSG cells に ア ポ ト ー シ ス を 発 lure し な い ト ポ イ ソ メ レ ー ス resistance against tonic に つ い て は hnRNP A1 発 の now reduce は 観 examine さ れ な か っ た. Youdaoplaceholder0 c-mycやp53に また て て occurrence <s:1> change 観 observe されな されな った った. The BCL - 2 に つ い て は 発 amount is very low に か が っ た た め に う ま く 検 out す る こ と が で き な か っ た. Point to the annual は こ れ ら の を tread ま え て BCL - 2 の の 検 Gao Gan degrees out method to establish な ら び に beg, さ 検 ら に は BCL - x に つ い て も beg し 検 て い き た い.

项目成果

Y.Onishi: "4-Piperidinopiperidine-resistant lymphoma cells were resistant to dexamethasone-and A23187-induced apoptosis." Cancer Letters. (in press). (1998)

Y.Onishi：“4-哌啶基哌啶耐药性淋巴瘤细胞对地塞米松和 A23187 诱导的细胞凋亡具有耐药性。”

Y.Onishi: "Inflammation and apoptosis." Bull.Tokyo Dental Coll.38. 65-76 (1997)

Y.Onishi：“炎症和细胞凋亡。”

Y.Onishi: "The resistant lymphoma cell line resistant to 4-piperidinopiperidine were less-sensitive to CPT-11." Cancer Chemother.Pharmacol.39. 473-478 (1997)

Y.Onishi：“对 4-哌啶子哌啶耐药的耐药淋巴瘤细胞系对 CPT-11 不太敏感。”

Y.Nishimoto: "Protein synthesis dependent and independent apoptosis of murine splenic T cells." Bull.Tokyo Dental Coll.38. 133-138 (1997)

Y.Nishimoto：“小鼠脾 T 细胞的蛋白质合成依赖性和非依赖性凋亡。”

Y.Tanimoto: "Peptidyl aldehyde inhibitors of proteasome induce apoptosis rapidly in mouse lymphoma RVC cells." J.Biochem.121. 542-549 (1997)

Y.Tanimoto：“蛋白酶体肽醛抑制剂可快速诱导小鼠淋巴瘤 RVC 细胞凋亡。”