破骨細胞の波状縁膜蛋白質に対するモノクローナル抗体セットの作製
抗破骨细胞波纹膜蛋白单克隆抗体组的产生
基本信息
- 批准号:09771541
- 负责人:
- 金额:$ 1.09万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
盛んに骨を吸収している破骨細胞の骨に面した細胞膜は褶曲しており,刷子縁と呼ばれる特殊な構造をとっている.この刷子縁膜と質的に類似した生体膜を大量調整することを目的として,破骨細胞にラテックスビーズを取り込ませてファゴソームを形成させ,その性状解析を行った.ビーズを取り込んだ細胞を経時的に回収・破砕し,ファゴソームを単離し,その中に含まれるリソソーム性プロテアーゼ,カテプシンKおよびカテプシンDの量的変化をウェスタンブロッティングで検出した.カテプシンKは形成後間もないファゴソームに一過性に集積するが,その量は時間の経過と共に減少していった.一方,カテプシンDの集積は時間がたつにつれて著明となり24時間後に最大となった.生体内で骨を吸収している破骨細胞に免疫染色を施すと,カテプシンKは刷子縁および骨吸収窩で陽性であるのに対し,カテプシンDは細胞内にとどまるように顆粒状に存在している.すなわち,我々が破骨細胞で形成させたラテックスビーズ-ファゴソームは,形成間もないうちは破骨細胞の波状縁と類似の膜組成を持っている可能性が考えられた.この形成初期のファゴソームは大量調整可能であり,モノクローナル抗体作製のための抗原として利用できると考えている.また,我々のファゴソーム形成の実験結果は,リソソーム性酵素でありながら,カテプシンKとカテプシンDはそれぞれ異なる経路で破骨細胞内を輸送され,異なる時間経過で作用すべくプログラミングされている可能性を示唆している.
Sheng ん に を bone absorption 収 し て い る osteoclast の bone に surface し た membrane は fold し て お り, brush try と shout ば れ る な special tectonic を と っ て い る. こ の brush try membrane と qualitative に similar し た raw body membrane を large adjustment す る こ と を purpose と し て, osteoclast に ラ テ ッ ク ス ビ ー ズ を take り 込 ま せ て フ ァ ゴ ソ ー ム を form さ せ, そ の Line shape analytic を っ た. ビ ー ズ を take り 込 ん だ cells を 経 に 収 · back the broken 砕 し, フ ァ ゴ ソ ー ム を 単 し, そ の に in containing ま れ る リ ソ ソ ー ム sex プ ロ テ ア ー ゼ, カ テ プ シ ン K お よ び カ テ プ シ ン D の quantity variations of the を ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ で 検 out し た. カ テ プ シ ン K は も between after the formation of な い フ ァ ゴ ソ Youdaoplaceholder0 ムに is a transient に accumulation するが, and the そ <s:1> amount <s:1> time <e:1> decreases に over と. One side,カテプシ がた D, the NTH, accumulates <s:1> time がた に れて れて れて, and it is stated that に is the maximum となった after とな カテプシ 24 hours. Born the で bone を suction 収 し て い る osteoclast に immune dyeing を shi す と, カ テ プ シ ン K は brush try お よ び bone absorption 収 nest で positive で あ る の に し, seaborne カ テ プ シ ン D は intracellular に と ど ま る よ う に granular に exist し て い る. す な わ ち, I 々 で が osteoclast formation さ せ た ラ テ ッ ク ス ビ ー ズ - フ ァ ゴ ソ ー ム は, formation Between も な い う ち は osteoclast の wavy try と similar の membranes を hold っ て い る possibility が exam え ら れ た. こ の formed の フ ァ ゴ ソ ー ム は a large number of adjustment can で あ り, モ ノ ク ロ ー ナ ル antibodies for making の た め の antigen と し て using で き る と exam え て い る. ま た, I 々 の フ ァ ゴ ソ ー ム form の be は 験 results, リ ソ ソ ー ム Sexual enzyme で あ り な が ら, カ テ プ シ ン K と カ テ プ シ ン D は そ れ ぞ れ different な る で 経 road in osteoclast を conveying さ れ, different な る time 経 role で す べ く プ ロ グ ラ ミ ン グ さ れ て い を る possibility in stopping し て い る.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
E.Kobayashi: "Force induced rapid changes in cell fate at midpalatal suture cartilage of growing rats" J.Dent.Res.(in Press). (1999)
E.Kobayashi:“力引起生长大鼠腭中缝软骨细胞命运的快速变化”J.Dent.Res.(出版中)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
坂井 英昭ら: "新生プリペプチド鎖に競合的に結合するタンパク質群の解析" 日本薬理学雑誌. 111. 74P- (1998)
Hideaki Sakai 等人:“竞争性结合新生前肽链的蛋白质的分析”日本药理学杂志 111. 74P- (1998)。
- DOI:
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坂井 詠子其他文献
Cobalt protoporphyrin prevents osteoclastogenesis via blocking of IkappaB phosphorylation
钴原卟啉通过阻断 IkappaB 磷酸化来防止破骨细胞生成
- DOI:
- 发表时间:
2014 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
八島 由佳;岡元 邦彰;坂井 詠子;西下 一久;筑波 隆幸 - 通讯作者:
筑波 隆幸
口腔癌(特に舌癌)と頸部リンパ節転移の超音波診断
口腔癌(特别是舌癌)及颈部淋巴结转移的超声诊断
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
坂井 詠子;Farhana Fatima;小栁 悠;山口 優,筑波 隆幸;林 孝文 - 通讯作者:
林 孝文
Rufy4はRUNドメインを介して破骨細胞による骨吸収を制御する
Rufy4 通过其 RUN 结构域控制破骨细胞的骨吸收
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
坂井 詠子;Farhana Fatima;小栁 悠;山口 優,筑波 隆幸 - 通讯作者:
山口 優,筑波 隆幸
大気圧走査電子顕微鏡ASEMによる骨組織再構築の水中免疫電顕法とcryo-TEM観察.
使用大气压扫描电子显微镜 (ASEM) 进行骨组织重建的水下免疫电子显微镜和冷冻 TEM 观察。
- DOI:
- 发表时间:
2019 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
佐藤 主税;杉本 真也;籏野 悠里;佐藤 真理;坂井 詠子 - 通讯作者:
坂井 詠子
坂井 詠子的其他文献
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ミオシンVIの破骨細胞における機能:細胞内小胞輸送の方向性と波状縁形成のメカニズム
肌球蛋白VI在破骨细胞中的功能:细胞内囊泡运输方向和波状边缘形成机制
- 批准号:
12771108 - 财政年份:2000
- 资助金额:
$ 1.09万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)