HDLアポリポ蛋白解析による全身性アミロイドーシスの生化学的診断法の検討

利用HDL载脂蛋白分析对系统性淀粉样变性的生化诊断方法进行检验

• 批准号: 09772070
• 负责人: 山田 俊幸
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09772070/
• 关键词: アミロイドーシス; 多発性骨髄腫; 慢性関節リウマチ; 人工透析; HDL; アポリポ蛋白AI; アポリポ蛋白AII; マウス; リコンビナント蛋白; 酵素免疫測定法

基礎疾患を持つ全身性アミロイドーシス患者(ア症)において、血清アポAI,AII濃度の測定がアミロイドーシスの診断に有用かどうかを調べた。対象は多発性骨髄腫(MM)21例(うちア症合併8例)、慢性関節リウマチ(RA)95例(合併45例)、人工透析(HD)73例(合併32例)で、アポAII濃度はア症合併例で低値を示した。アポAII/AI比0.2をカットオフとすると各基礎疾患群でのア症診断の感度、特異性はMM群で、50%、100%、RA群で80%、78%、HD群で46%、90%となり、この指標がア症を診断する上で有用(特にRA群)であることが示された。なおこの指標は、腎症の存在、炎症活動性に影響されなかった。この機序を解明するためにRA群ア症のモデルである、マウス実験アミロイドーシスでのアポA蛋白の挙動を解析した。特異抗体を作製し、それぞれの測定系を確立した。両アポA蛋白ともア症発症マウスで低下し、アポAIIの低下がより顕著であり、ヒトでの成績と同様であった。しかし、アポA濃度は炎症活動性の影響を受けるため、肝でのmRNAの変化をRT-PCR法で調べた。アミロイド生成後期、安定期には、炎症が鎮静化し、アポAmRNAの低下は明確でなかった。一方、アミロイド生成期には、沈着中でアポAの存在が免疫組織化学的に確認されたことより、この時期のアポAの濃度低下は合成低下ではなく、アポAがHDLとともにアミロイド生成に巻き込まれることによる可能性が示唆された。よって血清アポA濃度が、アミロイド形成の状態を反映する指標になると期待される。

Basic diseases を hold つ systemic ア ミ ロ イ ド ー シ ス (ア disease) patients with に お い て, serum ア ポ AI, AII concentration determination の が ア ミ ロ イ ド ー シ ス の useful diagnostic に か ど う か を adjustable べ た. Like は seaborne 発 more bone marrow is swollen (MM) 21 cases (う ち ア merger 8 cases), chronic masato section リ ウ マ チ (RA), 95 cases (45 cases), artificial dialysis (HD) 73 cases of 32 cases (merger) で, ア ポ AII concentration は ア disease on merger cases で low numerical を shown し た. ア ポ AII/AI than 0.2 を カ ッ ト オ フ と す る と each basic diseases group で の ア の sensitivity and specificity of diagnosis は で MM group, 50%, 100%, RA group 80%, 78%, HD で group 46%, 90% と で な り, こ の index が を ア disease diagnosis す る で useful (に RA group) on で あ る こ と が shown さ れ た. The なお <s:1> <s:1> index, the presence of renal syndrome <e:1>, and the activity of inflammation に affect されな った った. こ の machine sequence を interpret す る た め に RA group ア disease の モ デ ル で あ る, マ ウ ス be 験 ア ミ ロ イ ド ー シ ス で の ア ポ A protein の 挙 dynamic analytical し を た. The specific antibody を is prepared and それぞれ is determined by を to establish た た. Struck ア ポ A protein と も ア disease 発 disease マ ウ ス で し, ア ポ AII の low が よ り 顕 the で あ り, ヒ ト で の grades と with others で あ っ た. The effects of <s:1> で and アポA concentrations and the inflammatory activity <e:1> are を regulated by けるため and liver で <s:1> mRNA <s:1> variation をRT-PCR で. Youdaoplaceholder0 ア ロ ロ ド ド ド in the late stage of production, the stable stage に, inflammation が sedation <s:1>, アポAmRNA <s:1> hypoplasia and でな に った った. Side, ア ミ ロ イ ド phase generated に は, shen in で ア ポ exist A の が immunohistochemical に confirm さ れ た こ と よ り, こ の period の ア ポ A low concentration of の は synthetic low で は な く, ア ポ A が HDL と と も に ア ミ ロ イ ド generated に 巻 き 込 ま れ る こ と に よ が る possibility in stopping さ れ た. よ っ て serum ア ポ が, A concentration ア ミ ロ イ ド の state formation を reflect す る index に な る と expect さ れ る.

项目成果

Yamada,Toshiyuki: "Generation and characterization of rat monoclonal antibodies against human serum amyloid A" Scandinavian Journal of Immunology. 46. 175-179 (1997)

Yamada，Toshiyuki：“针对人血清淀粉样蛋白 A 的大鼠单克隆抗体的生成和表征”斯堪的纳维亚免疫学杂志。

山田 俊幸: "血清アミロイドA(SAA)の生理的変動とデキサメサゾン投与の影響" 臨床病理. 45. 696-698 (1997)

Toshiyuki Yamada：“血清淀粉样蛋白 A (SAA) 的生理波动和地塞米松给药的影响”《临床病理学》45. 696-698 (1997)。

Yamada,Toshiyuki: "Effect of a serum amyloid A on cellular affinity of low density lipoprotein." European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry. 35. 421-426 (1997)

Yamada, Toshiyuki：“血清淀粉样蛋白 A 对低密度脂蛋白细胞亲和力的影响。”

山田俊幸: "PCR-RFLP法による血清アミロイドAIアリル分析と頻度" 臨床病理. 47. (1998)

Toshiyuki Yamada：“使用 PCR-RFLP 方法进行血清淀粉样蛋白 AI 等位基因分析和频率”《临床病理学》47。（1998）

和田厚文: "SAA(血清アミロイドA蛋白)の高感度測定法の確立とクリアランス測定への応用" 臨床病理. 46. 1252-1257 (1998)

Atsufumi Wada：“SAA（血清淀粉样蛋白 A 蛋白）高灵敏度测量方法的建立及其在清除率测量中的应用”《临床病理学》46. 1252-1257 (1998)。