雑種細胞における組織特異的転写因子LEF-1の発現抑制機構の解析

组织特异性转录因子LEF-1在杂交细胞中表达抑制机制分析

• 批准号: 05770235
• 负责人: 山田 俊幸
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Sasaki Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770235/
• 关键词: TCR; CD3遺伝子; 組織特異的転写因子; 雑種細胞

報告者らはマウスT細胞リンパ腫EL4とマウス線維芽細胞B82との雑種細胞中ではT細胞抗原受容体(TCR)alpha遺伝子の発現が抑制されること、さらに同遺伝子の発現に重要な役割を果たすと考えられているリンパ球特異的転写因子LEF-1の発現がmRNAレベルで抑制されることを見いだした。本研究においては、次のステップとしてLEF-1遺伝子の上流領域を解析し、雑種細胞において同遺伝子の発現を「負」に制御する部位の同定を試みた。しかしながら現在まで検索した限りでは、そのような部位を明確に同定するには至っていない。そこで雑種細胞におけるT細胞特異的遺伝子の発現抑制機構をさらに追求するため、上記EL4xB82雑種細胞に加えEL4にマウス形質細胞腫S194を融合した雑種細胞においてTCR/CD3(TCRalpha,beta,gamma,CD3delta,epsilon)遺伝子およびこれら遺伝子の発現に関与すると考えられているいくつかの組織特異的転写因子(LEF-1,GATA-3,Ets-1,PEBP2alphaA)遺伝子の発現抑制をノーザン法により解析した。EL4xB82雑種細胞においてはCD3epsilon、Ets-1、PEBP2alphaA以外の遺伝子の発現は著しく抑制されていた。一方、EL4xS194雑種細胞においてはEL4xB82雑種細胞で発現の見られた上記3遺伝子に加えてTCRalpha、CD3delta、LEF-1遺伝子の発現も認められた。なおすべての遺伝子が両雑種細胞中に保持されていることはサザン法により確認された。以上の結果から雑種細胞においてはTCR/CD3遺伝子の発現抑制が認められること、またその発現抑制には組織特異的転写因子遺伝子の発現抑制が関与していることが示唆された。さらに2系の雑種細胞間においてこれらの遺伝子の発現抑制パターンに差がみられることから、線維芽細胞におけるこれら遺伝子に対する発現抑制機構と形質細胞におけるそれとは異なっていると考えられた。

The reporter reported that the T cell antigen receptor (TCR) alpha allele in cell B82 was detected by the reporter to detect the effect of the cell antigen acceptor (TCR) alpha gene in the cell B82. The results showed that the T cell antigen acceptor (TCR) in the same cell had a significant effect on the performance of important equipment. The write factor of the global signature, LEF-1, showed that the cell antigen receptor (mRNA) had an inhibitory effect on the target cell. The purpose of this study is to analyze the high-level field analysis of the LEF-1 system, and to verify that the location of the system is the same as that of the control system. There is a clear agreement between the location of the cable and the location of the location. It has been found that all kinds of cells have been integrated into different kinds of cells, such as TCR/CD3 (TCRalpha,beta,gamma,CD3delta), EL4xB82 cells, EL4 cells, cells. Epsilon) the writing factor (LEF-1,GATA-3,Ets-1,PEBP2alphaA) of the organization feature is suppressed by the suppression of the method of analysis. Several kinds of EL4xB82 cells have been used to inhibit the use of drugs other than CD3epsilon, Ets-1, and PEBP2alphaA. On the one hand, EL4xS194 and other EL4xB82 cell operators can add TCRalpha, CD3delta, and LEF-1 cells to make sure that there are some errors in each cell. Please ensure that you do not need to make sure that you do not have any information in your cell. As a result of the above results, several kinds of cell experiments have shown that the TCR/CD3 subsets have the ability to suppress the activity of the tissue, and that the write factors that inhibit the organization's characteristics have the effect of inhibiting the activity and instigating the effect. In the second series of intercellular communication systems, there is a significant reduction in the number of cells in the cell, the number of cells, and so on.

项目成果

Yamada T.: "Extinction of T cell receptor alpha-chain gene expression accompanied by loss of the lymphoid enhancer-binding factor 1(LEF-1)in murine somatic cell hybrick" Molecular and Cellular Biology. 13. 1943-1950 (1993)

Yamada T.：“小鼠体细胞 hybrick 中 T 细胞受体 α 链基因表达的消失伴随着淋巴增强子结合因子 1 (LEF-1) 的丧失”《分子与细胞生物学》。