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ダウン症出生前診断のためのAFP,hCG及びE3の三成分同時定量法の開発

AFP、hCG、E3三成分同时测定唐氏综合症产前诊断方法的建立

基本信息

批准号：
09772072
负责人：
伊藤克敏
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

希土類イオンキレートを標識体とする時間分解蛍光イムノアッセイ(TR-FIA)は高感度かつ多成分を同時に測定するイムノアッセイを確立することが可能である。本申請では,希土類イオンとしてEu^<3+>とSm^<3+>を用い,ダウン症出生前診断のマーカーである母胎血中AFP,hCG及びエストリオール(E3)の三成分の同時測定を目的とするTR-FIAについて検討した。AFP及びhCGはサンドイッチ法,E3は競合法で測定した。三成分を同一ウェル上で測定するために,AFP及びhCGはマイクロタイタープレート上で,E3はTSPプレート上で反応させ,このマイクロタイタープレートにTSPプレートを被せることにより三成分同時定量を行った。本三成分同時定量における検量域はAFPが3.91-1000ng/mL,hCGが877-250000IU/L,E3が0.39-100ng/mLの範囲で得られ,これらはいずれも妊婦の正常値を十分測定できるものであった。また同時再現性は日内及び日間でそれぞれAFPが1.81-9.84%及び4.93-15.83%,hCGが2.98-9.47%及び5.34-21.04%,E3が3.05-8.93%及び6.26-21.70%と良好であった。さらに本法と従来法との相関はAFPがr=0.987,hCGがr=0.924,E3がr=0.938と良好であった。本法は多数の検体を希釈せずに同時定量することができ,分析に要する時間も2時間弱と迅速な方法であるためマススクリーニング法としても有用であると思われる。また,2種の希土類イオンを標識に用いる3種の分析対象物の同時アッセイ法は,本報告が初めてである。

It is possible to establish a high sensitivity, simultaneous determination of multiple components by TR-FIA. This application aims at simultaneous determination of AFP,hCG and E3 in maternal and fetal blood for prenatal diagnosis of fetal diseases. AFP and hCG were determined by the method of anti-virus and E3 by the method of anti-virus. The three components were determined simultaneously by AFP and hCG. The three components were simultaneously quantified in the range of AFP 3.91-1000ng/mL,hCG 877-250000IU/L,E3 0.39-100ng/mL. The simultaneous reproducibility was good for AFP 1.81-9.84% and 4.93- 15.83%, hCG 2.98-9.47% and 5.34- 21.04%, E3 3.05-8.93% and 6.26-21.70%. This law is good for AFP r= 0.987, hCG r= 0.924, E3 r=0.938. This method is useful for determining the quantity of a substance. The method of simultaneous identification of 3 of the 2 rare earth species is the first step in this report.