伸張性収縮によるラット下腿三頭筋線維損傷への核DNA酸化機構の役割

核DNA氧化机制在大鼠小腿三头肌牵张性收缩损伤中的作用

基本信息

批准号：
09780090
负责人：
只野ちがや
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Toho University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では前年度本課題実績として報告した「運動後の活動筋内で生じる核DNA酸化的傷害の増大に対する筋線維膜損傷の関与」について更に詳細な知見を得るため,代謝亢進の要素を除外した注射針刺入による筋線維損傷モデルによる検討を行った.実験にはwistar系雄性ラットの腓腹筋を用い,経皮上より注射針(16G)を筋腹に1回刺入し,刺入直後,1時間後,3時間後,6時間後,24時間後に被験肢と対側肢の被験筋を摘出した(NI群).また,注射針刺入後より1時間の平地走行(10m/min,0deg)を負荷し,直後に摘出したEX-NI群と,注射針刺入直後にコルヒチン(1ml/kg)を腹腔内に投与し,24時間後に摘出したCol-NI群についても被験肢と対側肢で比較を行った.摘出筋は直ちに液体窒素にて凍結し,-80℃にて保存した.核DNAの酸化的損傷は抽出したデオキシグアノシン(dG)中の8-ヒドロキシデオキシグアノシン(8-OH-dG)を指標とした.その結果,NI群では非侵襲肢に比して8-OH-dG/dG値が直後に上昇し,1・3・6時間後には変化は認められず,24時間後に再び上昇した.この結果は,これまでに分かったラットのダウンヒル走行(20m/min,-17deg,1時間)実験の結果(運動終了時と24時間後に上昇,3時間後には変化せず)と同様の傾向を示した(昨年度実績報告分).よって,運動時に見られた核DNA酸化障害には筋線維膜損傷の関与が大きいことが示唆された.また,EX-NI群では運動後(刺入1時間後)に非侵襲肢に比して8-OH-dG/dGが上昇したことから運動が膜損傷部位のDNA損傷を増大させる可能性が考えられた.さらに,NI群の24時間後にみられた8-OH-dG/dGの上昇は,Col-NI群では認められなかったことから,回復24時間目以降の核DNA酸化的傷害増加には,炎症反応の関与が大きいことが考えられ,運動中或いは直後とは異なる機序であると推察された.

在这项研究中，我们调查了“运动后，肌肉纤维膜损伤参与活性肌肉中核DNA的氧化损伤的参与”，这是这项研究的一年的结果，使用了由针插入引起的肌肉纤维损伤的模型，这排除了增加代谢的因素。在实验中，我们使用了来自Wistar的雄性大鼠的胃癌，一旦将针（16G）植入肌肉腹部，并在插入后立即将测试肢体和对侧肢体的肌肉从插入后，1小时，3小时，6小时，以及在插入后（NI组）的limbers（ni组）后，将其移除，并在插入后的limbers（ni组）中移动。注射，并在注射后立即去除的前NI组，并在注射后立即腹膜内给予秋水仙碱（1 mL/kg），并在24小时后移除的Col-Ni组。立即将切除的肌肉冷冻在液氮中，并保存在-80°C下。使用8-羟基氧鸟苷（8-OH-DG）在提取的脱氧鸟苷（DG）中使用氧化损伤作为指数。结果，与非侵入性肢体相比，NI组之后的8-OH-DG/DG值立即上升，1、3和6小时后未观察到变化，并且在24小时后再次观察到。该结果显示出与以前下坡运行的结果（20 m/min，-17 ver，1小时）实验（在运动结束时和24小时，而不是3小时后）的结果相似的趋势（去年的报道）。因此，运动过程中对核DNA氧化的损害在很大程度上与肌纤维膜的损害有关。这暗示着。此外，与非侵入性四肢相比，运动后（插入后1小时）的8-OH-DG/DG增加，这表明运动可能会增加膜损伤部位的DNA损伤。此外，由于在COL-NI组未观察到Ni组后24小时观察到8-OH-DG/DG的增加，因此人们认为炎症反应与恢复24小时后氧化核DNA损伤的增加有关，并且估计在运动后或锻炼后与此相关的机制是不同的机制。