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遺伝子レベルでの発現制御による細胞膜スフィンゴ脂質の生物学的機能解析

通过基因水平调控表达对细胞膜鞘脂进行生物学功能分析

基本信息

批准号：
09780586
负责人：
市川進一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

スフィンゴ糖脂質(糖脂質)は、細胞膜上に存在し300種以上の分子種から成る一群の物質である。これらの糖脂質は、その大半がグルコシルセラミドを経て合成される。しかしながら細胞膜上における糖脂質の生物学的機能は現在に至るまでほとんど明かにされていない。本研究は、糖脂質の発現を遺伝子レベルで制御し、解析することによりその機能を明かにすることを目的としている。本年度は、ヒトのグルコシルセラミド合成酵素遺伝子のクローニングに成功し、現在解析を行なっている。又、昨年度クローニングしたマウスグルコシルセラミド合成酵素遺伝子の詳細な解析を修了した。本酵素の遺伝子は、9個のエクソンと8個のイントロンから構成される32kbの遺伝子を有していた。この遺伝子のプロモターは、TATABoxやCAATBoxを持たず転写因子であるSplによって恒常的に転写されていることを明かにした。また細胞内のセラミド濃度が上昇する、様々な現象でプロモーターが活性化することを明かにし、セラミドのグルコシル化反応が、セカンドメッセンジャーでもある基質セラミドの、細胞内濃度調節に関与している可能性を示した。さらに様々な種類の細胞に分化し得るES細胞の、本酵素遺伝子を相同組み換え法によって破壊することに成功した。この細胞株を用いることにより、様々な種類の正常細胞で本酵素の役割を研究することが出来るようになると期待される。

There are more than 300 molecular species on the cell membrane and a group of substances on the cell membrane. Most of the sugar lipids in the mixture were synthesized by chemical reaction. The biological function of glycolipids on cell membranes has changed from present to future. The purpose of this study is to clarify the function of glycolipid production, control and analysis. This year, we successfully developed a new method for the analysis of synthetic enzyme genes. In addition, the detailed analysis of synthetic enzyme gene was revised in the past year. This enzyme contains 9 fragments and 8 fragments, and consists of 32kb fragments. This is the first time that a computer has been installed in a computer, and the first time that a computer has been installed in a computer, a computer has been installed in a computer. The increase in intracellular cell concentrations, the increase in intracellular cell activity, the increase in intracellular cell concentration, and the possibility of intracellular cell concentration regulation. In addition, ES cells were successfully differentiated from different kinds of cells by the same method of enzyme transformation. The cell lines were used to study the enzyme activity in normal cells of different species.