プレB細胞受容体シグナルによりチロシンリン酸化される36kDタンパク質の解析

前 B 细胞受体信号磷酸化的 36kD 蛋白酪氨酸分析

• 批准号: 10770149
• 负责人: 永田 喜三郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770149/
• 关键词: B細胞; プレB細胞受容体; シグナル伝達; チロシンリン酸化; 脂質化; Igβ; B細胞分化; プレB細胞; プロB細胞受容体; プロB細胞

我々は、プレB細胞受容体を介するシグナル伝達経路を解析するための新たなシステムを確立している。すなわち、骨髄プロB細胞上のIgβ分子の特異的抗体による架橋が、プレB細胞受容体を介するシグナルと同等のシグナルを細胞内に伝達できることを明らかにした。このシステムを応用して、Igβ分子架橋により誘導されるチロシンリン酸化されるタンパク質を調べると、幾つか検出されるチロシンリン酸化タンパク質のうち分子量36kDのタンパク質がプレB細胞受容体からの特異的シグナルに関わっている可能性が強く示唆された。チロシンリン酸化される36kDタンパク質としては、Grb2と会合してT細胞受容体シグナルに重要なアダプター分子であるLATが一候補に挙げられる。しかしこの36kDタンパク質は、Grb2との会合が認められなかったことから、LATとは異なる新規分子であると考えられ、この36kDタンパク質の精製を開始した。過酸化バナジン処理した63-12細胞の可溶画分を原料とし、SDS電気泳動溶出システム、DEAEイオン交換クロマトグラフィー、抗リン酸化チロシン抗体(4G10)アフィニティークロマトグラフィー、および高速液体クロマトグラフィーの過程を経て36kDタンパク質の精製に成功した。そしてタンデムマススペクトル法を用いて部分アミノ酸配列を明らかにした。その結果、精製した36kDタンパク質は新規分子であることが分かったので、我々はさらに36kDタンパク質の全長cDNAおよびゲノムを取得し、その配列も明らかにした。現在遺伝子工学的手法を用いてこの分子の生理的機能の解析を進めている。

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项目成果

真木一茂: "B細胞免疫不全症-Xidマウス、IgH鎖遺伝子KOマウス"血液・免疫・腫瘍. 4巻3号. 31-35 (1999)

Kazushige Maki：“B细胞免疫缺陷-Xid小鼠，IgH链基因KO小鼠”《血液、免疫学和肿瘤》第4卷，第3.31-35期(1999)。

永田喜三郎: "Annual Review免疫 1999" 中外医学社, 1-13 (1998)

永田喜三郎：《免疫学年度评论 1999》《中外医学社》，1-13 (1998)

永田喜三郎: "エッセンシャル化学辞典" 東京化学同人, (1998)

永田喜三郎：《化学基础词典》东京化学同人，（1998）

永田喜三郎: "プレB細胞レセプターの役割とシグナル伝達" 臨床免疫. 30. 593-600 (1998)

Kisaburo Nagata：“前 B 细胞受体的作用和信号转导”临床免疫学 30. 593-600 (1998)。

真木一茂: "プレB細胞受容体による免疫グロブリン遺伝子再構成の制御"臨床遺伝子学'99. 最新医学増刊号. 16-24 (1999)

Kazushige Maki：“前 B 细胞受体控制免疫球蛋白基因重排”《临床遗传学》99 年最新医学特刊。