新たなHPV DNA検出・タイピング法の確立とその臨床応用に関する検討

新型HPV DNA检测/分型方法的建立及临床应用的思考

• 批准号: 10770854
• 负责人: 中川 博之
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770854/
• 关键词: 子宮頚癌; HPV(human papilloma virus)、PCR(polymerase chain reaction); SSCP(single strand conformation polymorphism); 子宮首頸癌; PCR(polymerase chain reaction); HPV(human papilloma virus)

1)L1コンセンサスプライマーの内側に新たなコンセンサスプライマーを設定し、nested PCRを行った。検出感度をsingle L1 PCRと比較したところ、約10倍の感度が得られた。SSCP法により16、18、31、35、51、52、56の各型についてタイピング可能であることが確認された。2)nested L1 PCR-SSCP法で子宮頚部異形成95例の細胞診検体につきHPVの検出・タイピングを行い、L1 PCR-RFLP法による結果と比較した。結果の異なったものについて塩基配列を解析した。HPV16型の判定において、L1 PCR-RFLP法では、4例の偽陽性と2例の偽陰性が見られた。それらは全て重複感染例であった。重複感染はL1 PCR-RFLP法では約10%に、nested L1 PCR-SSCP法では約40%に見られた。3)子宮頚癌組織検体37例についてnested L1 PCR-SSCP法にてHPVの検出・タイピングを行ったが、重複感染は全く見られなかった。HPVの重複感染は、子宮頚部異形成において病的意義を持つ可能性が示唆されたが、子宮頚部発癌に直接の関係はないと思われた。4)レーザー円錐切除術前にHPV陽性で、術後6ヶ月以上経過観察が可能であった45例中5例で子宮頚部細胞診はクラスIIIaであり,うち2例でHPV陽性(35型,51型)が持続した。円切後に追加手術を行った8例のうち、摘出子宮に浸潤癌がみられた1例では18型が、CISがみられた1例では16型が円切前後で認められた。摘出標本で残存腫瘍がみられなかった4例と極少量の残存腫瘍が肉芽組織で厚く被われていた2例では円切後にはHPVは検出されなかった。円切術後の経過観察において、nested L1 PCR-SSCP法でHPV陽性の場合は厳重な管理が必要であることが示唆された。

1) L1

项目成果

Nakagawa H,et.al.: "The influence of laser conization on subsequent pregnancy" Int.J.Gynecol.Cancer. 7. 91 (1997)

Nakakawa H 等人：“激光锥切术对后续妊娠的影响”Int.J.Gynecol.Cancer。

中川博之、野澤志朗 他: "新たな高感度のHPV-DNA検出・タイピング法(nested PCR-SSCP法)の確立とそのレーザー円錐切除術後経過観察への応用"腫瘍マーカー研究会誌. 14. 65-66 (1999)

Hiroyuki Nakakawa、Shiro Nozawa等人：“一种新的高灵敏度HPV-DNA检测/分型方法（巢式PCR-SSCP方法）的建立及其在激光锥切后随访观察中的应用”肿瘤标志物研究会杂志14. 65 -66 (1999)

Nakagawa H,Nozawa S et.al.: "The influence of laser conization on subsequent pregnancy"Int.J.Gynecol.Cancer. 7. 91 (1997)

Nakakawa H、Nozawa S 等人：“激光锥切术对后续妊娠的影响”Int.J.Gynecol.Cancer。

中川博之、他: "新たな高感度のHPV-DNA検出・タイピング法(nested PCR-SSCP法)の確立とそのレーザー円錐切除術後経過観察への応用" 腫瘍マーカー研究会誌. 14(投稿中). (1998)

Hiroyuki Nakakawa 等人：“一种新的高灵敏度 HPV-DNA 检测/分型方法（巢式 PCR-SSCP 方法）的建立及其在激光锥切后随访观察中的应用”，肿瘤标志物研究学会杂志 14（。目前正在提交）（1998）