新しい蛋白分解酵素阻害剤としての扁平上皮癌関連蛋白SCC抗原の多様性と機能解析

新型蛋白酶抑制剂鳞状细胞癌相关蛋白SCC抗原的多样性及功能分析

• 批准号: 10770837
• 负责人: 縄田 修吾
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770837/
• 关键词: SCC抗原; 腫瘍マーカー; 扁平上皮癌; ケラチノサイト; 分子多様性; セルピンファミリー; 蛋白分解酵素; 2次元電気泳動; 偏平上皮癌; 電気泳動

近年,SCC抗原をコードする遺伝子が2個(SCCA1,SCCA2)あり,アミノ酸配列上相同性の非常に高いSCC抗原-1,SCC抗原-2が存在することが確認され注目されているが,その生物活性及び分子多様性については未だ十分に解明されていない.今回,扁平上皮癌および正常扁平上皮でのSCC抗原の分子多様性を,2次元電気泳動法を用い解析した.2次元電気泳動法は1次元目に未変性条件によるキャピラリー等電点電気泳動を行い,2次元目に変性条件であるSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動を施行した.癌組織中SCC抗原は,分子量45.000の領域に等電点6.4から5.9の亜分画以外(SCCA1由来)に,等電点5.7から5.5の亜分画(SCCA2由来)が存在することを見いだした.一方,正常人ケラチノサイトにおけるSCC抗原発現を検討した結果,培養液中カルシウム濃度を増加させると細胞内SCC抗原(等電点6.4および等電点5.7の亜分画が主体)は増加し,逆に培養液中SCC抗原(等電点6.4の亜分画が大部分)は減少することが示唆された.癌あるいは正常扁平上皮においてSCC抗原-1蛋白,SCC抗原-2蛋白の発現,分泌には差があると考えられた.さらに,これまでSCC抗原はキモトリプシン,カテプシンLと複合体を形成しその蛋白分解酵素活性を阻害することを示してきたが,免疫染色法にて組織中SCC抗原を検出すると新たに電気泳動上高分子量領域にSCC抗原の亜分画を認め,生体内においてSCC抗原は標的蛋白解酵素と反応している可能性が考えられた.

In recent years, two SCC antigens (SCCA1 and SCCA2) have been identified, and their biological activities and molecular diversity have not been fully clarified. The molecular diversity of SCC antigen in squamous cell carcinoma and normal squamous epithelium was analyzed by two-dimensional electrokinetic method. The two-dimensional electrokinetic method was used to analyze the molecular diversity of SCC antigen in squamous cell carcinoma and normal squamous cell carcinoma. SCC antigen exists in cancer tissues except for isoelectric point 6.4 ~ 5.9 (SCCA1 origin) and isoelectric point 5.7 ~ 5.5 (SCCA2 origin) with molecular weight of 45.000. On the other hand, the SCC antigen expression in normal individuals was examined. As the SCC antigen concentration in the culture medium increased, the SCC antigen (isoelectric point 6.4 - 5.7) in the cells increased, while the SCC antigen (isoelectric point 6.4 - 5.7) in the culture medium decreased. SCC antigen-1 protein and SCC antigen-2 protein are expressed and secreted in normal squamous epithelium. In addition, SCC antigen can be detected in tissues by immunostaining, and the proteolytic enzyme activity of SCC antigen can be detected in high molecular weight domain.

项目成果

縄田修吾: "SCC腫瘍マーカーの発現とその機能解析" 生物物理化学. 42. 257-263 (1998)

Shugo Nawata：“SCC肿瘤标志物的表达及其功能分析”生物物理化学42。257-263（1998）。

縄田修吾: "SCC腫瘍マーカーの発現とその機能解析"生物物理化学. 42. 257-263 (1998)

Shugo Nawata：“SCC肿瘤标志物的表达及其功能分析”生物物理化学42。257-263（1998）。

Shugo Nawata: "Identification of squamous cell carcinoma antigen-2 in tumor tissue by two-dimensional electrophoresis"Electrophoresis. 20. 614-617 (1999)

Shugo Nawata：“通过二维电泳鉴定肿瘤组织中的鳞状细胞癌抗原2”电泳。

Shugo Nawata: "Identification of squamous cell carcinoma antigen-2 in tumor tissue by two-dimensional electrophoresis" Electrophoresis. 20(発表予定). (1999)

Shugo Nawata：“通过二维电泳鉴定肿瘤组织中的鳞状细胞癌抗原 2”，电泳 20（待发表）。