ディファレンシャル・ディスプレイ法による根尖性歯根吸収調節因子の解析

微分显示法分析根尖吸收调节因素

• 批准号: 10771169
• 负责人: 松本 芳郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771169/
• 关键词: 歯の移動; 歯科矯正; 骨吸収; 歯根吸収; MMP-1; カテプシンK; In situ hybridization; 歯根吸収調節因子; 歯根尖; 咬合挙上; 外傷性咬合; ディファレンシャル・ディスプレイ

7週齢雄性SDラットの上顎臼歯の歯間に矯正用ゴムを挿入して上顎臼歯を近遠心的に移動し,歯根吸収を引き起こした。7日後に灌流固定し,蟻酸にて上顎骨標本を脱灰後,通法通りパラフィン切片を作成した。コラーゲン分解酵素であるマトリックスメタロプロテイナーゼ-1(MMP-1)およびカテプシンKのmRNAを検出するため,ジゴキシゲニン標識RNAプローブを用いたin situ hybridization法を上顎骨脱灰切片に対して行った。また,破歯細胞および破骨細胞の同定のため,酵素組織化学的手法による酒石酸抵抗性酸ホスファターゼ(TRAP)染色を隣接切片に対して行った。MMP-1のmRNAは線維芽細胞様細胞,セメント芽細胞,骨芽細胞で検出されたが,TRAP陽性の破歯細胞および破骨細胞では検出されなかった。また,MMP-1のmRNAは,破歯細胞近傍に存在するセメント細胞や骨細胞に強く発現していた。すなわち,歯の移動に伴う歯根吸収において,MMP-1によるコラーゲンの分解は,破歯細胞以外の周囲の細胞により行われていると考えられた。一方,カテプシンKのmRNAは破歯細胞および破骨細胞にのみ発現していた。すなわち,歯の移動に伴う歯根吸収の際に,カテプシンKによるコラーゲンの分解は,破歯細胞により行われていると考えられた。以上の結果から,MMP-1およびカテプシンKは,骨吸収と同様に歯の移動における歯根吸収の際にも,重要な役割を果たしていることが明らかとなった。

将正畸橡胶插入7周大的雄性SD大鼠的上磨牙之间，以极大地移动上颌磨牙，从而导致根吸收。 7天后，将试样灌注，并用甲酸将上颌骨脱钙，并根据该方法制备石蜡切片。为了检测胶原蛋白降解酶基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和组织蛋白酶K的mRNA，使用二氨基蛋白的RNA探针进行了原位杂交方法，以脱磷化的上颌骨切片进行了原位杂交方法。另外，通过酶组织化学技术在相邻切片上进行抗性酸性酸性磷酸酶（TRAP）染色，以鉴定牙齿骨折和破骨细胞。在成纤维细胞样细胞，胶质细胞和成骨细胞中检测到MMP-1 mRNA，但在陷阱阳性牙列和破骨细胞中未检测到。此外，MMP-1 mRNA在位于牙齿断裂细胞附近的水泥细胞和骨细胞中强烈表达。换句话说，人们认为，MMP-1胶原蛋白的降解是由牙齿破裂细胞以外的其他细胞在根吸收期间伴有牙齿运动的。另一方面，仅在牙列细胞和破骨细胞中表达组织蛋白酶K的mRNA。换句话说，人们认为在根吸收期间，组织蛋白酶k胶原蛋白伴有牙齿运动的降解是由牙齿断裂细胞进行的。以上结果表明，MMP-1和组织蛋白酶K在牙齿运动和骨吸收中起着重要作用。

项目成果

Sayaka Domon: "In situ hybridization for matrix metalloproteinase-1 and catepsin-K in rat root-resorbing tissue induced by tooth movement"Archives of Oral Biology. 44・11. 907-915 (1999)

Sayaka Domon：“牙齿移动诱导的大鼠根吸收组织中基质金属蛋白酶-1 和组织蛋白酶-K 的原位杂交”口腔生物学档案 44・11（1999）。