ポルフィロモナス・ジンジバリスのアルギニンカルボキシペプチダーゼの病原性について

牙龈卟啉单胞菌精氨酸羧肽酶的致病性

• 批准号: 10771186
• 负责人: 増田 かなめ
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771186/
• 关键词: 歯周病原性細菌; Porphyromonas gingivalis; アルギニンカルボキシペプチダーゼ; 歯周病; Prophyromonas gingivalis

歯周病原性細菌のPorphyromonas gingivalisは、糖を分解することができないため、様々なタンパク分解酵素を産生し、これらの酵素によって遊離したアミノ酸を代謝してエネルギーを獲得しているものと考えられている。著者は、本菌の培養上清においてアルギニンの著しい消失を認め、またアルギニンからのATP産生を認めたことから、アルギニンを本菌の生育に関与するアミノ酸の一つとして考えている。そこで、タンパク質からアルギニンの遊離に関与するアルギニンカルボキシペプチダーゼを菌体より抽出し、分離・精製を行った。精製した酵素の部分アミノ酸配列を調べ、このアミノ酸配列をコードする本菌のゲノムマップを構築しているコンティグを探し、遺伝子解析を行った。推定されたタンパク質をコードするopen reading frameに基づいたアミノ酸配列のホモロジー検索を行ったところ、zinc carboxypeptidase familyと相同性が認められ、zinc-binding regions signatureを示す共通配列が存在することが明らかとなった。また酵素活性の阻害実験においても同様の性質を示すことがわかった。カルボキシペプチダーゼの特異的阻害剤であるDL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthio-propanoic acid(MGTA)を培地に添加して、本菌の増殖に対する影響を調べたところ、濃度依存的に生育の阻害を示した。以上のことから、本酵素は、同菌の産生するアルギニンアミノペプチダーゼ(Arg-gingipain,trypsin-like protease)との共同作用により、栄養源となるアルギニンを周囲の組織から遊離し、このことが本菌の増殖と病原性に重要な役割を果たしていると考えられる。

歯 weeks pathogenic bacteria の Porphyromonas gingivalis は, sugar を decomposition す る こ と が で き な い た め, others 々 な タ ン パ ク を し, decomposition enzyme こ れ ら の enzyme に よ っ て free し た ア ミ を ノ acid metabolism し て エ ネ ル ギ ー を get し て い る も の と exam え ら れ て い る. Author は, this bacterium の culture supernatant に お い て ア ル ギ ニ ン の the し い disappear を confess め, ま た ア ル ギ ニ ン か ら の ATP produced を recognize め た こ と か ら, ア ル ギ ニ ン を this bacterium の fertility に masato and す る ア ミ ノ acid の a つ と し て exam え て い る. そ こ で, タ ン パ ク qualitative か ら ア ル ギ ニ ン の free に masato and す る ア ル ギ ニ ン カ ル ボ キ シ ペ プ チ ダ ー ゼ を bacteria よ り spare し, separation, refining を っ た. Refined し た enzyme の part ア ミ ノ acid with column を べ, こ の ア ミ ノ acid with column を コ ー ド す る this bacterium の ゲ ノ ム マ ッ プ を build し て い る コ ン テ ィ グ を agent し line, but 伝 analytical を っ た. Presumption さ れ た タ ン パ ク qualitative を コ ー ド す る open reading frame に base づ い た ア ミ ノ acid with column の ホ モ ロ ジ ー 検 cable line を っ た と こ ろ, any zinc carboxypeptidase family と identity が recognize め ら れ, any zinc - binding regions The signatureを indicates that the す common configuration が exists in the する する とが とが sign ら ら となった. The activity of the また enzyme is inhibited by the experiment of にお にお て て また. Similar to を properties を show す とがわ とがわ った った った. Youdaoplaceholder0 ボキシペプチダ ボキシペプチダ ゼ ゼ the specific inhibitor of であるDL-2-mercaptomethyl-3-guanidinoethylthio-propanoic Acid (MGTA) を petty に add し て, this bacterium の raised colonization に す seaborne る influence を adjustable べ た と こ ろ, concentration dependent family に の を shown し た. Above の こ と か ら, this enzyme は, from bacteria の す る ア ル ギ ニ ン ア ミ ノ ペ プ チ ダ ー ゼ (Arg - gingipain, trypsin - like Combination of protease) と の に よ り, tech students.their ownship source と な る ア ル ギ ニ ン を weeks 囲 の organization か ら free し, こ の こ と が の raised this bacteria colonization と pathogenicity に important な "を cut fruit た し て い る と exam え ら れ る.

项目成果

K.Masuda: "Characterization of Arginine Carboxypeptidase from Porphyromonas gingivalis"Journal of dental research. 78. -507 (1999)

K.Masuda：“牙龈卟啉单胞菌精氨酸羧肽酶的表征”牙科研究杂志。

増田 かなめ: "Porphyromonas gingivalisの産生するアルギニンカルボキシペプチダーゼの遺伝子解析"口腔衛生学会雑誌. 49. 628-629 (1999)

Kaname Masuda：“牙龈卟啉单胞菌产生的精氨酸羧肽酶的基因分析”口腔健康协会杂志 49. 628-629 (1999)。