バラ科植物の突然変異体を用いた自家不和合性花粉側因子の探索

利用蔷薇科植物突变体寻找自交不亲和花粉因子

• 批准号: 11760008
• 负责人: 佐々 英徳
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760008/
• 关键词: 自家不和合性; 突然変異体; RNase; 花粉; 雌ずい; 染色体歩行; コスミドライブラリー; バラ科

染色体歩行によって花粉S遺伝子を同定することを目指し、アーモンドの突然変異体「Jeffries」の原品種「Nonpareil」(S^cS^d)、そしてナシの突然変異体「おさ二十世紀」の原品種「二十世紀」(S^2S^4)を用い、コスミドライブラリーを構築した。これまでにアーモンドについては、11のクローンによってS^c対立遺伝子領域を200kbp以上にわたってカバーするコスミドコンティグを構築した。コスミドクローンの末端や内部の断片をプローブとして、ゲノミックサザンブロット解析を行った。その結果、Sc-RNase遺伝子の近傍約70kbpの領域は比較的Sc対立遺伝子に特異的な配列に富むのに対し、それ以上Sc-RNase遺伝子から離れた領域では、比較的S対立遺伝子間で配列が保存されている傾向が示された。アブラナ科のS遺伝子座の解析結果などから雌ずいS遺伝子と花粉S遺伝子の近傍は比較的S対立遺伝子に特異的な配列に富む傾向があると考えられることから、アーモンドの花粉Sc遺伝子はSc-RNase遺伝子の近傍約70kbpの領域に存在する可能性が高いと考えられた。以上の結果については論文として投稿し、Genetics誌に受理された。ナシについては、現在までにS4-RNase遺伝子を含む100kbp以上のコンティグを構築した。コスミドクローンの末端や内部の断片を用いてゲノミックサザンブロット解析を行った結果、「おさ二十世紀」のS^4対立遺伝子領域の欠失範囲はコスミドコンティグのカバーする範囲(約100kbp)よりも大きいことが示された。「おさ二十世紀」はS^4-RNase遺伝子は欠失しているが花粉S^4遺伝子の機能は正常であることから、この結果はナシのS4対立遺伝子領域アーモンドSc対立遺伝子領域より大きく、ナシ花粉S^4遺伝子はコスミドコンティグでカバーされている領域内には存在しないことを示している。

Chromosome step line に よ っ て pollen S posthumous son 伝 を with fixed す る こ と を refers し, ア ー モ ン ド の suddenly - variants "Jeffries の" the original "Nonpareil" cS ^ ^ d (S), そ し て ナ シ の suddenly - variants "お さ twentieth century" の the original "twentieth century" (S ^ 2 S ^ 4) を い, コ ス ミ ド ラ イ ブ Youdaoplaceholder0 ラリ を construct た. こ れ ま で に ア ー モ ン ド に つ い て は, 11 の ク ロ ー ン に よ っ て S ^ c set seaborne heritage 伝 sub-fields を above 200 KBP に わ た っ て カ バ ー す る コ ス ミ ド コ ン テ ィ グ を build し た. コ ス ミ ド ク ロ ー ン の end や internal の fragment を プ ロ ー ブ と し て, ゲ ノ ミ ッ ク サ ザ ン ブ ロ ッ ト parsing line を っ た. そ の results, Sc - RNase but 伝 の about split roughly 70 KBP の field は compared Sc state polices of 伝 に specific な match sequence に rich む の に し, seaborne そ れ above traces of Sc - RNase 伝 son か ら from れ で た field S state polices of は, comparative 伝 で match between child columns が save さ れ て い る tendency が shown さ れ た. ア ブ ラ ナ secco の S heritage 伝 stroma の analytical results な ど か ら female ず い S heritage 伝 pollen S posthumous child と 伝 is の nearly alongside は S state polices of 伝 に specific な match sequence に rich む tendency が あ る と exam え ら れ る こ と か ら, ア ー モ ン ド の pollen traces of Sc 伝 child は Sc - RNase but 伝 の about split roughly 70 KBP に の field exist す が high る possibilities Youdaoplaceholder0 と test えられた. The above <s:1> results are に, に, て, て, と, て, and are accepted for submission. The journal of Genetics に accepts された submissions. ナ シ に つ い て は, now ま で に S4 - RNase posthumous son 伝 を contains more than 100 KBP む の コ ン テ ィ グ を build し た. コ ス ミ ド ク ロ ー ン の end internal の を fragment with や い て ゲ ノ ミ ッ ク サ ザ ン ブ ロ ッ ト parsing line を っ た results, "お さ twentieth century" の S ^ 4 set seaborne heritage 伝 sub-fields の owe anomie 囲 は コ ス ミ ド コ ン テ ィ グ の カ バ ー す る van 囲 (about 100 KBP) よ り も big き い こ と が shown さ れ た. "お さ twentieth century" は S ^ 4 - RNase heritage 伝 は owe son lost し て い る が traces of pollen S ^ 4 伝 son の function normal で は あ る こ と か ら, こ の results は ナ シ の S4 state heritage seaborne 伝 sub-fields ア ー モ ン ド Sc state heritage seaborne 伝 sub-fields よ り big き く, ナ シ traces of pollen S ^ 4 伝 son は コ ス ミ ド コ ン テ ィ グ で カ バ ー さ れ て い る field Youdaoplaceholder0 に exists in the presence of に な な とを とを とを とを とを indicating て る る る.

项目成果

Tamura,M. et al.: "Identification of self-incompatibility genotypes of almond by allele-specific PCR analysis"Theoretical and Applied Genetics. 101. 344-349 (2000)

田村，M.

Tao,R. et al.: "Molecular typing of S-alleles through identification, characterization and cPNA cloning for S-Rnases in sweet cherry"J. Amer. Soc. Hort. Sci.. 124. 224-233 (1999)

陶，R.

Kimura, T. et al.: "N^α-acetylation and proteolytic activity of the yeast 20S ppvoteasome"J. Biol. Chem.. 275. 4635-4639 (2000)

Kimura, T. 等人：“酵母 20S ppvoteasome 的 N^α-乙酰化和蛋白水解活性”J. Biol. 275. 4635-4639 (2000)

Ushijima.K. et al: "Characterization of the S locus region of almond (Prunus dulcis) : analysis of a somaclonal mutant and a cosmid contig for an S haplotype"Genetics. (印刷中).

Ushijima.K. 等人：“杏仁（Prunus dulcis）S 基因座区域的表征：S 单倍型的体细胞克隆突变体和粘粒重叠群的分析”（正在出版）。

Tamura, M. et al.: "Identification of self-incompatibility genotypes of almonds by allele-specific PCR analysis"Theor. Appl. Genet.. (印刷中).

Tamura, M. 等人：“通过等位基因特异性 PCR 分析鉴定杏仁的自交不亲和性基因型”Appl。