タイト結合構成蛋白クラウディンの機能についての分子解剖学的研究

紧密连接蛋白（一种构成紧密连接的蛋白质）功能的分子解剖学研究

• 批准号: 11770008
• 负责人: 稲井 哲一朗
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770008/
• 关键词: claudin-1; ZO-1; tight junction; freeze fracture; epithelial barrier; MDCK cell

タイト結合(TJ)構成蛋白claudin-1(CL-1)は、N末とC末を細胞質側に向け細胞膜を4回貫通している。また、TJの裏打ち蛋白であるZO-1は、CL-1のC末と結合している。(1)CL-1のC末にmyc-tagを付けて、MDCK細胞で過剰発現した。その結果、transepithelial electrical resistance(TER)値が上昇し、FITC-dextranによる細胞間透過性が減少した。このことから、CL-1の過剰発現によりMDCK細胞のバリア機能が亢進することがわかった。この結果はEuropean Journal of Cell Biology 78(12):849-855,1999に発表した。(2)CL-1のZO-1結合ドメインと考えられているC末端領域を除去してMDCK細胞で発現した。これをΔCmycと呼ぶ。その結果、本来TJがない細胞の側面膜に、TJ様の構造ができることがフリーズフラクチャーの観察でわかった。フラクチャーラベルにより、このTJ様のストランドはΔCmycで構成されていることがわかった。このことから、CL-1はZO-1との結合非依存性にTJ様のストランドを形成できるが、このストランドがTJへ局在化するためにはZO-1との結合が関与していることが示唆された。ΔCmycの発現によりTER値はやや上昇するが、FITC-dextranによる細胞間透過性はほとんど変化しなかった。

TJ was used to form protein claudin-1 (CL-1), and N-terminal C-terminal cells were linked to the membrane of the cell membrane for 4 times. Serum albumin, TJ protein, ZO-1 protein and CL-1 C terminal protein were detected by Elisa, Elisa and Elisa. (1) at the end of CL-1

项目成果

T.Inai,J.Kobayashi,Y.Shibata: "Claudin-1 contributes to the epithelial barrier function in MDCK cells."European Journal of Cell Biology. 78・12. 849-855 (1999)

T.Inai、J.Kobayashi、Y.Shibata：“Claudin-1 有助于 MDCK 细胞的上皮屏障功能。”欧洲细胞生物学杂志 78・12（1999）。