Study of the role of desmosome cadherin in cell motility and lymph node metastasis

桥粒钙粘蛋白在细胞运动和淋巴结转移中的作用研究

• 批准号: 22K09921
• 负责人: 稲井 哲一朗
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09921/
• 关键词: squamous cell carcinoma; Lymph node metastasis; E-cadherin; Desmoglein-1; Desmoglein-2; Desmoglein-3; デスモソーム; 細胞運動; リンパ節転移; ケラチノサイト

本研究は、アドヘレンス結合蛋白E-cadherin (Ecad)、デスモソーム蛋白Desmoglein (DSG) 1、DSG3の発現の組合せに着目し、口腔扁平上皮癌(OSCC)で集団運動が起こっている可能性と上皮層内部で起こる初期変化を調べることを目的とする。令和４年度は、DSG1およびDSG3をゲノム編集により、遺伝子破壊した安定細胞株をマウスケラチノサイト(K38)で作成すること、OSCC患者の生検試料を収集することが当初の計画であった。令和４年度は、DSG3遺伝子をゲノム編集で破壊したK38細胞株DSG3KO、さらにEGFPを発現するEGFP-DSG3KOを作製した。Ca添加による細胞接着形成過程で、DSG1の細胞接着部位への集積がDSG3KOではWT（野生型K38）に比べ遅延することがわかった。細胞接着形成後の接着強度をDissociation assayで調べると、DSG3KOはWTより接着強度が減弱し、１日後より３日後でさらに接着強度が弱まることが分かった。DSG3とp38 MAPKとの関連が報告されており、今回の結果がp38 MAPKの活性化と関連があるか来年度は調べる。また、K38はDSG1, DSG2, DSG3が発現しており、デスモソーム形成において、同種のDSGによるホモ結合か異種のDSGによるヘテロ結合かは明らかでない。WTとEGFP-DSG3KOを混合培養して、異種細胞間結合 (WTとEGFP-DSG3KOの間の結合)を免疫染色で調べた。その結果、DSG1, DSG2はすべての異種細胞間結合にみられたが、DSG3は異種細胞間結合には一部を除いてみられなかった。この結果から、DSG3の大部分はDSG3同氏のホモ結合で接着していると考えられた。これらの結果を総合すると、DSG3の欠失は、デスモソーム形成を遅延し、細胞間結合を弱めることがわかった。

This study は, ア ド ヘ レ ン ス binding protein E - cadherin (Ecad), デ ス モ ソ ー ム protein Desmoglein (DSG) 1, DSG3 の 発 is の combination せ に mesh し, oral squamous cell carcinoma (OSCC) で 団 movement が up こ っ て い る possibility と cortex internal で up こ る early - the を adjustable べ る こ と を purpose と す る. And four year は, DSG1 お よ び DSG3 を ゲ ノ compiling に ム よ り, but 伝 broken 壊 し た stable cell lines を マ ウ ス ケ ラ チ ノ サ イ ト (K38) で す consummate る こ と, patients with OSCC の 検 sample を 収 set す る こ と が の original plan で あ っ た. Make and traces of 4 year は DSG3 伝 son を ゲ ノ compiling で ム broken 壊 し た K38 cell lines DSG3KO, さ ら に EGFP を 発 now す る EGFP - DSG3KO を cropping し た. Ca add に よ る cell formation then で, DSG1 の cells then parts へ の set product が DSG3KO で は WT (wild type K38) に than べ 遅 delay す る こ と が わ か っ た. Cells then を の then strength after the formation of Dissociation assay で adjustable べ る と, DSG3KO は WT よ り then strength weakened が し, 1st よ り 3 later で さ ら に が then strength weak ま る こ と が points か っ た. DSG3 と p38 lightning MAPK と の masato even が report さ れ て お り, today back to の results が p38 lightning MAPK の activeness と masato even が あ る か to the yearly は べ る. ま た, K38 は DSG1 DSG2, DSG3 が 発 now し て お り, デ ス モ ソ ー ム form に お い て, same の DSG に よ る ホ モ combining か heterogeneous の DSG に よ る ヘ テ ロ combining か は Ming ら か で な い. WTとEGFP-DSG3KOを mixed culture <s:1> て, interspecies cell binding (WTとEGFP-DSG3KO <s:1> interspecies <s:1> binding)を immunostaining で modulation べた. そ の results, DSG1 DSG2 は す べ て の between heterogeneous cells combined with に み ら れ た が, DSG3 は between heterogeneous cells combined with に は a を except い て み ら れ な か っ た. The <s:1> <s:1> results show that ら ら, most of the <s:1> DSG3 are combined with ホモ で, and then <s:1> て ると ると are used to test えられた. こ れ ら の results を 総 close す る と, DSG3 の owe は loss, デ ス モ ソ ー ム form を 遅 delay し, between cells combined with weak を め る こ と が わ か っ た.

项目成果

デスモソーム蛋白desmoglein 3欠損がケラチノサイトに及ぼす影響の解析

桥粒蛋白桥粒糖蛋白3缺乏对角质形成细胞的影响分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 小川修平;大谷崇仁;緒方佳代子;稲井哲一朗
• 通讯作者: 稲井哲一朗