アポトーシス心筋細胞に対する貧食機序の検討

凋亡心肌细胞吞噬机制的检查

• 批准号: 11770356
• 负责人: 小原 幸
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770356/
• 关键词: Apoptosis; 心筋細胞; apoptosis

本年度はin vitro培養心筋細胞及び、in vivo心筋梗塞モデルを用い、アポトーシス細胞の表面抗原の変化及び、ケモカイン産生を検討した。I)in vitro培養心筋細胞での検討〈方法〉 新生仔ラット培養心室筋細胞に、staurosporinを4時間添加し、アポトーシスを誘導した。Hoe33258染色にてアポトーシスを評価した。細胞表面抗原の検索として、抗主要組織適合抗原(MHC)classII抗体染色を行い、ケモカイン産生を評価する目的で、抗IL-8抗体による免疫染色を行った。〈結果〉 staurosporin投与により16.9±2.8%の心筋細胞にアポトーシスが誘導された。表面抗原の検討においては、staurosporin投与で、MHC classII染色陽性細胞が増加する傾向にあった。また、ケモカイン産生に関しては、Hoe33258とIL8の二重染色を行ったが、アポトーシス細胞にIL8産生は認めなかった。II) in vivo心筋梗塞モデルでの検討。〈方法〉 ラット左冠動脈を30分結紮後24時間再灌流し、再灌流後の心臓を組織学的検討に供した。心筋アポトーシスはTUNEL染色にて検討した。また、アポトーシス細胞のケモカイン産生能を検討するため、抗IL8抗体、抗MCP1抗体で免疫染色を行った。〈結果〉 心筋梗塞壊死巣周辺部にアポトーシス細胞を19.4±0.9%認めた。抗IL8抗体染色は、浸潤細胞に陽性を認めたのみであった。一方、抗MCP1抗体染色は単球、血管平滑筋細胞、及び梗塞周辺部心筋細胞において陽性であり、TUNELとの二重染色において、TUNEL陽性細胞の55.8±3.9%の心筋細胞がMCP1染色陽性であった。昨年度、同様の心筋梗塞モデルで梗塞周辺領域においてMHC classII抗原の発現を報告している。以上の結果より、心筋アポトーシスにおいて、MHC classII抗原の発現により膜表面の抗原性に変化を来たし、かつ、MCP1産生により細胞除去を受けやすい条件を提供している可能性が考えられた。

This year, we will investigate the changes in surface antigens of cultured cardiac muscle cells in vitro and in vivo. I) Study of ventricular tendon cells cultured in vitro <Methods> Newborn ventricular tendon cells cultured in vitro were induced by 4-hour addition of staurosporin. Hoe33258 dyeing process Detection of cell surface antigens, anti-MHC classII antibody staining, anti-IL-8 antibody immunostaining for the purpose of evaluation of cell surface antigen production The results showed that 16.9±2.8% of cardiac muscle cells were induced by staurosporin. Surface antigen detection, staurosporin staining, MHC classII staining positive cells increased Double staining of IL-8 by Hoe33258 and IL-8 production by Hoe33258 II) in vivo myocardial infarction. Methods: The left coronary artery was ligated at 30 minutes and then reperfused at 24 hours. Tendon staining Immunostaining was performed with anti-IL8 antibody and anti-MCP 1 antibody. Results: 19.4±0.9% of myocardial infarction patients were identified as peripheral blood cells. Anti-IL8 antibody staining is positive for infiltrating cells. 55.8±3.9% of myocardial cells stained for MCP 1 were positive for TUNEL and double staining for TUNEL. In the past year, the same pattern of myocardial infarction was reported in the peripheral region of the infarction. These results suggest the possibility of MHC classII antigen production, membrane surface antigenic transformation, MCP1 production, cell removal, and response conditions.