p57を用いた悪性神経膠腫の遺伝子治療実験モデルの作製と解析

p57恶性胶质瘤基因治疗实验模型的制备与分析

• 批准号: 11770776
• 负责人: 継 淳
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770776/
• 关键词: p57; 神経膠腫; 老化; アポトーシス; G1 arrest; P57

p57は細胞周期関連蛋白として注目されているCDK inhibitorの1つである。まず代表的なヒト悪性神経膠腫細胞株3株(U87MG,U343MG-A,U373MG)に、Tetracycline regulated systemに組み込まれたp57cDNAを導入させ安定したtransfectantsを樹立した。それらの樹立株においてp57遺伝子を強制発現させると、それら腫瘍細胞は完全に増殖能を失い発現を維持する限りG1 arrestを続けた。また形態学的には、p57遺伝子を強制発現させることにより親細胞とは全く異なる細胞質の平坦腫大化した、いわゆるlarge flat cellに変化した。この形態は従来からいわれている老化細胞に近似しており、老化細胞を同定するSA-β-Gal染色を行ったところ陽性像を示した。ところが樹立株3株の生存曲線を求めたところ、U373MGのtransfectantのみが有意に経時的な生存細胞数の減少を認めた。単に腫瘍細胞がG1 arrestから老化の方向に向かうだけであれば、この現象は全く理解に苦しむものでありさらに検討した。するとU373MGのtransfectantでは確かにp57遺伝子発現によるlarge flat cell化を認めているが、一部に核の断片化を認め超微形態的にもクロマチン凝集などのアポトーシスに典型的にみられる変化を示す細胞を同定した。なぜこの樹立株のみに本現象が認められるのかは不明ではあるが、わたしはp53 statusに関連しているのではと考えた。するとU87MGとU343MG-Aはwild-type p53を発現していたが、U373MGはmutant typeであった。今までいくつかの癌細胞株においてp53に異常をもつ癌細胞でのアポトーシスが報告されており、わたしの同定した現象もそれに一致するものである可能性は高い。p57をヒト悪性神経膠腫細胞に強制発現させることにより、腫瘍細胞の増殖能を完全に抑制させさらに老化の方向にすすませるという強力な静細胞効果を確認した。またp53の異常型を有する細胞株ではp57強制発現によりアポトーシスを誘導できるという画期的な知見も得た。

P57, CDK inhibitor, protein, protein, cell cycle, protein, protein, protein, Three cell lines (U87MG, U343MG, p57cDNA, U373MG) and Tetracycline regulated system (transfectants, diazepam, diazepam and diazepam were selected. In this study, the plant was established and p57 cells were forced to completely colonize and maintain the capacity of G _ 1 arrest. The shape of the computer, the p57 computer, the computer, the large flat cell, the cell. The shape of the cell is similar to that of the aging cell, and the same as that of SA- β-Gal staining. The survival curve of the three plants was calculated and the number of survival cells of U373MG transfectantal cells was significantly lower than that of the other three plants. In the direction of "aging" in G1 arrest, the direction of "aging" is in the direction of "cell", "cell" and "aging". "U373MG" transfectant "make sure that" p57 "sub" shows that "large flat cell", "nuclear" fragment, "ultramicro", "agglutination"agglutination"typical"cell" shows that the cell is the same. I don't know how to set up a plant. I don't know. P53 status. U87MG, U343MG-A, wild-type, p53, U373MG, mutant type, and so on. Today, the cancer cell line