婦人科腫瘍におけるシステインプロテアーゼと浸潤および転移の関連性に関する検討

半胱氨酸蛋白酶与妇科肿瘤侵袭转移关系的研究

• 批准号: 11770948
• 负责人: 荒川 敦志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770948/
• 关键词: 浸潤転移; シスタチン; カテプシン; 婦人科癌

婦人科悪性腫瘍の浸潤や転移におけるシステインプロテアーゼ(カテプシンB、D、H、L)と、その生体内インヒビターであるシスタチンCの動態を検討するため、臨床検体にて以下の実験を行い結果を得た。1、当施設で治療され同意の得られた卵巣癌、子宮体癌及び子宮頚癌症例から得た臨床検体を用い、カテプシンB、D、H、LおよびシスタチンCの組織中の局在と活性をそれぞれの抗体を用いたWestern blotting法、免疫組織染色法にて検討した。免疫組織染色法の結果、悪性腫瘍症例の組織では抗ヒトカテプシンB抗体と抗ヒトシスタチンC抗体による染色性が認められ、抗ヒトカテプシンB抗体では癌細胞優位に、抗ヒトシスタチンC抗体では間質細胞優位に染色性が認められた。しかし、対照とした良性腫瘍症例の組織では染色性は認められなかった。また、抗ヒトカテプシンD、H、L抗体では、良性腫瘍、悪性腫瘍とも染色性は認められなかった。同様の結果がWestern blotting法によって確認された。2、治療前の患者血清を用いて、その血清中のシステインプロテアーゼおよびインヒビターの濃度をEIA法により測定し検討した。その結果血清中システインプロテアーゼの濃度は良性腫瘍患者および悪性腫瘍患者において上昇していないものの、インヒビターであるシスタチンCの血清中濃度は良性腫瘍患者に比べて悪性腫瘍患者で有意に上昇していることが確認された。3、ヒト卵巣癌培養細胞(TYK-nu)を用いたinvasion assay法にて、シスタチンCとカテプシンB阻害剤による浸潤抑制能を確認した。また、各々のプロテアーゼの培養細胞に対する影響を検討した。その結果シスタチンCとカテプシンB阻害剤は培養細胞の接着能および生存には関与せず、浸潤能を濃度依存性に抑制することが確認された。以上より、婦人科悪性腫瘍の浸潤機構において、カテプシンB-シスタチンC系の活性の亢進が認められ、カテプシンBの阻害により悪性腫瘍の浸潤能を抑制でき、また、血清中シスタチンC値の測定により、手術前診断の指標になる可能性が示唆された。

Infiltration and removal of gynecological tumors In vivo インヒビターであるシスタチンCのdynamic を検question するため, clinical 検体にて下の実験を行い resultsをgetた. 1. Cases of ovarian cancer, uterine corpus cancer, and uterine cancer can be obtained when the facility is approved for treatment and is clinically used.プシンB, D, H, L およびシスタチンCの区 in the tissue and active をそれぞれのantibodies いたWestern Blotting method and immunohistostaining method are all available. Result of immunohistostaining, confirmation of staining properties of anti-Tissue B antibody and anti-Tissue C antibody in the tissue of the patient's tumor case The anti-Tacin B antibody has a positive effect on cancer cells, and the anti-Tincon C antibody has a strong staining effect on interstitial cells.しかし, 対毾としたBenign tumor cases, tissue staining, められなかった.また, anti-ヒトカテプシンD, H, L antibody では, benign tumors, visceral tumors and とも staining められなかった. The same results were confirmed by Western blotting method. 2. Use the serum of the patient before treatment and the serum of the patient before treatment.ーゼおよびインヒビターのconcentrationをEIA methodによりdeterminationし検した.そのResults: The concentration of システインプロテアーゼの in the serum of patients with benign tumors および悪において increased in patients with benign tumors していないものの、インThe concentration of ヒビターであるシスタチンC in the serum of patients with benign tumors is higher than that of patients with benign tumors. It is confirmed that the concentration is higher. 3. The invasion inhibition ability of typhoid ovarian cancer cultured cells (TYK-nu) was confirmed using the いたinvasion assay method and the シスタチンCとカテプシンB inhibitory effect.また, each 々のプロテアーゼのcultured cell に対する affects を検した.そのRESULTS シスタチンC とカテプシンB inhibitor はcultivated cells のおよびSurvival risk and concentration-dependent inhibition of infiltration ability have been confirmed. Above, the infiltration mechanism of gynecological tumors, the infiltration mechanism of gynecological tumors, the activity of gynecological tumors, the active hyperactivity of シスタチンC series, the resistance of カテプシンB The infiltration ability of cystic tumors can inhibit the infiltration of cystic cysts and cystic cysts, and the measurement of cystic cystitis C in the serum and the indicator of preoperative diagnosis can indicate the possibility of cystic ulcer disease.