歯周病原性菌の鉄獲得を制御するレプレッサー蛋白の遺伝子クローニングと機能解析

控制牙周病原菌获取铁的阻遏蛋白的基因克隆和功能分析

• 批准号: 11771154
• 负责人: 久保庭 雅恵
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771154/
• 关键词: 歯周病原性菌; Porphyromonas gingivalis; 鉄獲得システム; fur; ヘモグロビン結合タンパク; Lys-gingipain; 歯周期病原性菌; Prphyromonas gingivalis; 遺伝子発現調節機構; クローニング

本研究では,Porphyromonas gingivalis(P.g)のもつ鉄獲得システムの発現調節機構を解明する目的で,まず,Escherichia coliのFerric uptake regulator protein(Fur)をコードする遺伝子(fur)と相同性の高い遺伝子配列がP.gゲノム上に存在するかどうかをサザンハイブリダイゼーション法を用いて調べた.その結果,E.coliのfurと弱く反応するバンドが1カ所のみ検出された.そこで,反応バンドの切り出し精製によってミニライブラリを作成し,Bacillus subtilisを宿主細菌として用いたコロニーハイブリダイゼーション法により,ミニライブラリ中のP.g遺伝子断片のスクリーニングをおこなった.ハイブリダイゼーションの反応性の弱さからE.coliのfurとP.gのfur様遺伝子はかなり相同性が低いことが予測され,クローニングは技術的困難を伴い成功しなかった.また,現在P.gの全ゲノム塩基配列の解読が進められているが,現時点で解読が終了し公表されている塩基配列中において,E.coliのfurとの相同性検索で検出される配列は認められなかった.我々はこれまでにP.gが産生するリジン特異的システインプロテアーゼ(KGP)がヘモグロビン結合能を有し,P.gの鉄獲得機構において重要な役割を果たしていることを明らかにしてきた.そこで同分子に対するDNAワクチンを作製し,P.g感染に対する防御効果をマウスを用いて評価したところ,明確な感染防御効果が認められた.このことから,KGPがP.gの病原性発揮という側面においても重要な役割を果たしていることが明らかとなった.

In this study, Porphyromonas gingivalis (P.G) has obtained the result that the organization can understand the purpose of the device, and that the Escherichia coli Ferric uptake regulator protein (Fur) is similar to each other (fur). In this study, there is a correlation between the two parts of the system (P.G). In this study, the results of the study show that the purpose of this study is to understand the purpose of the system. The results show that the E.coli fur has a weak response to the error caused by the error 1. In the first place, the Bacillus subtilis host bacteria were used in the production of the virus, and the host bacteria in the host were found to be in the middle of the disease, while the host bacteria in the host were found to be fine. This is not true because of the weakness of the E.coli, the fur, the P.G., the fur, the same, the same, the lower, the lower. Now that P.G.'s full-time distribution system is in progress, it is time to change the performance of the system in the public table, and the E.coli fur system is similar to each other. We don't know if you can use the combination of the special information system (KGP), which can be used to determine the importance of the operation of the machine. Because of the same molecular weight, the DNA virus is used to prevent infection, and P.G is infected with the virus to prevent infection. The pathogenicity of KGP

项目成果

M.Kuboniwa: "Specific Antibodies to Porphyromonas gingivitis Lys-Cingipain (KGP) by DNA Vaccination Inhibit Bacterial Binding to Hemoglobin and Protect Mice form Infection"Infection and Immunity. 69・5. (2001)

M.Kuboniwa：“通过DNA疫苗接种针对牙龈卟啉单胞菌Lys-Cingipain（KGP）的特异性抗体抑制细菌与血红蛋白的结合并保护小鼠免受感染”（2001年）。