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歯周病原性菌のシステインプロテアーゼを標的としたDNAワクチンの開発

开发针对牙周病原菌半胱氨酸蛋白酶的DNA疫苗

基本信息

批准号：
13771257
负责人：
久保庭雅恵
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

歯周病原性菌Porphyromonas gingivalisのリジン特異的システインプロテアーゼ(KGP)は,プロテアーゼとしての機能とヘモグロビン結合タンパクとしての機能を併せ持ち,本菌の増殖および病原性発揮に重要な役割を果たしていると考えられる.本研究では,KGPのプロテアーゼドメインと,P.g.のもう一つの主要なプロテアーゼであるアルギニン特異的システインプロテアーゼ(RGP)のプロテアーゼドメインを標的とした2種類のDNAワクチン,pSecTag2A/kgpcedおよびpSecTag2B/rgpcdを作製し,これらのDNAワクチンの抗原性とP.g.感染に対する防御効果をマウスモデルを用いて比較検討した.BALB/cマウスにそれぞれのDNAワクチンを週1回連続4週筋肉内注射し,7日おきに採血して血清中の抗原特異抗体価をELISA法により調べた.その結果,KGP特異抗体価はDNAワクチン初回接種日より3週目でほぼプラトーに達したが,RGP特異抗体価は4週目でKGPのそれの70%の上昇しか示さなかった.このことから,kgpDNAワクチン(pSecTag2A/kgpcd)は,rgpDNAワクチン(pSecTag2B/rgpcd)よりも高い免疫原性を有することが示された.次に,kgpDNAワクチンによって誘導された抗KGPcD IgG抗体がP.g.とヒトヘモグロビンとの結合に及ぼす影響を調べたところ,同抗体による結合阻害と,それに伴うP.g.の増殖遅延が認められた.さらに,マウスへのP.g.感染実験において,kgpDNAワクチンによる明確な感染防御効果が得られた.以上のことから,KGPはP.g.の鉄獲得のみならず,病原性の発揮においても重要な役割を果たしており,感染防御における標的分子として有効であることが示された.

A periapical pathogenic bacterium Porphyromonas gingivalis (KGP) is a highly pathogenic bacterium. It is a highly pathogenic bacterium. In this study, two types of DNA,pSecTag2A/kgpced and pSecTag2B/rgpcd, were produced from KGP's top ten species,pSecTag2A/kgpced and pSecTag2B/rgpcd. The antigenicity of DNA and P.g. infection were detected by ELISA. As a result,KGP specific antibody increased by 70% from the initial inoculation date of 3 weeks to the initial inoculation date of 4 weeks. The pSecTag2A/pkgcd is a highly immunogenic DNA fragment. In addition,kgpDNA can induce anti-KGPcD IgG antibodies to bind to P.g. and inhibit the proliferation of P.g. P.g. infection, kgpDNA infection, infection prevention, infection prevention, infection prevention. KGP is the target molecule for P.g. iron acquisition, pathogenicity development, and infection defense.