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角質バリアー機能におけるコルネオサイトエンベロープの生物物理学的意義の解明

阐明角质细胞包膜在角质层屏障功能中的生物物理意义

基本信息

批准号：
11771411
负责人：
山下富義
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

角化細胞の終末分化により形成される角質層は、生体の最外層を構成する組織であり、外界からの異物侵入に対する防御や体温調節・水分蒸散などの恒常性の維持を担っている。この皮膚のバリアー機構の実体を解明することは、皮膚の生理機能及びその異常を理解する上で極めて重要な課題である。corneocyte envelopeの形成不全を起こすtransglutaminase1遺伝子ノックアウト(TGase1^<-/->)マウスでは水分蒸散および物質透過性が異常に亢進していることから、角質バリアー能におけるcorneocyte envelopeの関与は極めて高いと考えられる。昨年度は組織レベルでの解析を行ったが、本年度はマウスより単離した細胞の初代培養系を用いて、細胞膜とcorneocyte envelopeとの相互作用を解析した。一定期間培養し70%コンフルエントに到達した後高カルシウム培地による培養を24時間行い、細胞膜をdiphenylhexatriene(DPH)で蛍光ラベルした。その蛍光異方性を測定したところ、通常の低カルシウム培地で培養した場合と比較したところほとんど違いが認められなかった。5-doxylstearic acidでスピンラベルしてESRスペクトルを測定した場合も両者の間で特に違いは認めれず、corneocyte envelopeの形成は細胞膜流動性に影響を与えないことが示唆された。TG-/-マウス皮膚のFTIRスペクトル解析では、CH2の対称および非対称伸縮基準振動スペクトルが消失することから、cornified envelopeの形成不全はむしろ細胞間脂質の合成あるいは細胞間への分泌の阻害を引き起こし、角質バリアー能を低下させるものと推測された。

The formation of keratinocytes in the terminal differentiation of the stratum corneum, the outermost layer of the organism, plays a role in the maintenance of homeostasis and defense against foreign body invasion. This is an important topic for understanding the physiological functions and abnormalities of the skin. The incomplete formation of cornea envelope starts with the transglutaminase1 gene (TGase1^<-/->), which is related to the abnormal increase of moisture evaporation and material permeability. The analysis of the interaction between cell membrane and neutrophil envelope in primary culture lines of cells was carried out in the past year and in this year. After a certain period of culture, when 70% of the culture medium reaches the high temperature, the cell membrane becomes bright and clear during 24-hour culture. The light is different from the light, usually the light is different from the light, and the light is different from the light. 5-The formation of deoxystearic acid and erythrocyte envelope affects the fluidity of cell membrane. FTIR analysis of TG-/-α-β