運動トレーニングに伴うヒト骨格筋の遺伝子発現に関する研究

点击翻译按钮获取中文摘要

生活習慣病の原因の一つに基礎代謝の低下が挙げられるが、それにはuncoupling protein(UCP)ファミリーが密接に関わっている。UCPファミリーは、運動トレーニングによって遺伝子発現が増加するので、運動による基礎代謝の亢進は、一部がUCPファミリーによるものであることが考えられる。そこで本研究は、近年報告されたSerial Analysis Gene Expression(SAGE)法を用いて、運動トレーニングによるヒト骨格筋でのUCPファミリーの遺伝子発現を検討することを目的とした。そしてその第一ステップとして、本年度はSAGE法の分析法をヒト骨格筋において確立することを目的とした。まず、ラットの骨格筋を用いて、mRNA extraction、 cDNA synthesis、Restriction of cDNA with anchoring endonuclease、 Extracting cDNA 3'tail with Dynal beads、 Ligating linkers to bound cDNA、 Release of cDNA tags using Tagging Enzyme、 Blunt ending released cDNA tags、 Ligating tags to form ditags、 PCR amplification of ditags、 Isolation of ditags、 Ligation of ditags to form concatemers、 Cloning concatemer,SequencingなどのSAGE法の各手法を確立した。次に、一般健常者3名に研究の趣旨を説明し同意を得た後、筋生検用Needleを用いて、大腿外側広筋中腹より局所麻酔下に約100mgの筋組織を採取した。現在この組織を分析している。