シナプス後肥厚部(PSD)構成蛋白質の分子構築と機能解析

构成突触后增厚区（PSD）的蛋白质的分子构建和功能分析

• 批准号: 11780560
• 负责人: 立花 太郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780560/
• 关键词: シナプス; PSD; モノクロナール抗体; ロイシンジッパー; グルタミン酸受容体; エンドサイトーシス; モノクローナル抗体; EVH1ドメイン; 代謝型グルタミン酸受容体; NMDA受容体

シナプス後肥厚部(post synaptic density : PSD)特異的モノクローナル抗体を作製し、複数の新規PSD蛋白質のクローニングに成功した。その中の1つ、PSD-Zip45はN末側にEVH1、C末側にロイシンジッパードメインを有していた。細胞内での発現実験などからPSD-Zip45はN末側で代謝型グルタミン酸受容体1型(mGluR)に結合し、ロイシンジッパーを介してmGluRをクラスター形成させることを明らかにした。他の結合蛋白を検索した結果、PSD-Zip45はNMDA受容体アンカー蛋白質や細胞骨格蛋白質など複数の蛋白質に結合することを見いだし、シナプスの分子構築において中心的な役割を果たしている可能性を示した。一方、PSD特異的モノクローナル抗体を用いて別にクローニングした新規蛋白質PSD-Zip70は、全長601アミノ酸、SDS-PAGE上の分子量が70kDaで、C末端側にロイシンジッパーモチーフを有しているが、その他に特徴的な配列は見い出せない。ノーザンブロット解析の結果、PSD-Zip70は神経特異的に発生の初期段階から発現していることが判明した。yeast two-hybrid法を用いて結合因子の探索を行ったところ、複数の蛋白質がPSD-Zip70に結合することが明らかとなった。その中のいくつかはエンドサイトーシス関連蛋白であり、PSD-Zip70はエンドサイトーシスに関わる分子である可能性が示唆された。

The antibody of the hypertrophic part (post synaptic density: PSD) was detected, and the number of new PSD protein was detected. At the end of the day, there is an error of 1, PSD-Zip45

项目成果

Tachibana T.,Hieda,Yokoya,Kose S.,Imamoto N.and Yoneda Y.: "A monoclonal antibody to the C-terminal acidic portion of Ran inhibits both recycling of Ran and nuclear protein import in living cells"J. Cell Biol.. 144. 645-655 (1999)

Tachibana T.、Hieda、Yokoya、Kose S.、Imamoto N. 和 Yoneda Y.：“Ran C 末端酸性部分的单克隆抗体抑制活细胞中 Ran 的循环和核蛋白输入”J.

Ikuta,T.: "Necleocytoplasmic shuttling of the aryl hydrocarbon receptor."J.Biochem.. 127. 503-509 (2000)

Ikuta,T.：“芳烃受体的核细胞质穿梭。”J.Biochem.. 127. 503-509 (2000)

Tanabe,K.: "The small GTP-binding protein TC10 promotes nerve elongation in neuronal cells, and its expression is induced during nerve regeneration in rats."J.Neurosci.. 20. 4138-4144 (2000)

Tanabe,K.：“小 GTP 结合蛋白 TC10 促进神经元细胞中的神经伸长，并且在大鼠神经再生过程中诱导其表达。”J. Neurosci.. 20. 4138-4144 (2000)

Kikuchi N.,Gohshi T.,Kawahire S.,Tachibana T.et al.: "Molecular Shape and ATP Binding Activity of Rat p50, a putative Mammalian Homologue of RuvB DNA Helicase"J. Biochem.. 125. 487-497 (1999)

Kikuchi N.、Gohshi T.、Kawahire S.、Tachibana T.等人：“RuvB DNA 解旋酶的假定哺乳动物同源物大鼠 p50 的分子形状和 ATP 结合活性”J。

Matsubae, M.: "Characterization of the nuclear transport of a novel leucine-rich acidic nuclear Protein-like protein"FEBS Lett.. 468. 171-175 (2000)

Matsubae, M.：“一种新型富含亮氨酸的酸性核蛋白样蛋白的核运输的表征”FEBS Lett.. 468. 171-175 (2000)