Roles of PSD lattice on PSD formation and its plastic change

PSD晶格对PSD形成及其塑性变化的作用

• 批准号: 22K06428
• 负责人: 鈴木 龍雄
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06428/
• 关键词: PSD; PSD lattice; structure; tubulin; microtubule; synaptic plasticity; synaptogenesis; structural plasticity; シナプス後肥厚部; 可塑性; シナプス構造

申請者らが確立した精製法によって得られたPSD lattice (以下 PSDL)を用いて、 PSDの構造可塑性のメカニズム解明を目指した。PSDに内在するtubulinが関与して LTP発現に関わっている可能性の検証を進めた。 PSDにおけるtubulinの存在形態は微小管ではないことは申請者らが明らかにしているが、その具体的生理機能は不明のままである。PSDにはLTP発現時に一過性にspine headに侵入する微小管が接触すると想定されている。本計画では、まずこの一時的な PSD-微小管相互作用に PSDL tubulinが関与している可能性の検証を目指した。まず、in vitroでのPSDLと tubulin/microtubule 相互作用系を構築した。 電顕用グリッドに貼った formvar膜にPSDLを固定し、 tubulin重合中の液滴と接触させて、経時的にサンプルを固定し、ネガティブ染色後、観察を行った。その結果、PSDLが 形成されつつある微小管と接触している詳細な電顕画像が得られた。また、精製 tubulin標品中に PSDL様の構造が生じていること、それが微小管と PSDLと類似の相互作用を行っていることが明らかになった。このことは、外部 tubulinとの相互作用において PSDL内 tubulinが中心的な役割を担っていること示唆するものである。さらに、PSDとtubulin との相互作用についても解析を行い、 PSDL同様の対tubulin相互作用を行っていることが明らかになった。以上の結果は、tubulinが主体となって形成される特殊骨格PSDLが PSDの構造基盤となっているという申請者らの主張と矛盾しないことが明らかになった。

The applicant established a refined method to obtain PSD lattice (hereinafter PSDL) for use, and the structural plasticity of PSD was clarified. PSD internal tubulin correlation with LTP occurrence PSD tubulin exists in the form of microtubule, and its specific physiological function is unknown. PSD is a transient spine-head device. In this project, we aim to investigate the relationship between PSD and tubulin and its potential in PSD-tubulin interaction. PSDL tubulin/microtubule interaction system is constructed in vitro. The PSDL is fixed on the formvar film used for electric motors, the droplets and contact during tubulin superposition, the support elements are fixed during the process, and after dyeing, observation is performed. As a result, PSDL is formed in tiny tubes and contact details. The structure of SDL in refined tubulin standard products is generated by the interaction of small tubes and PSDL. This is why the interaction of external tubulin and tubulin within PSDL plays a central role. The interaction between PSD and tubulin is analyzed and the interaction between PSD and tubulin is analyzed. As a result, the main body of the tubulin is formed into a special framework PSDL and the structural base of the PSD is contradictory to the applicant's claim.