Roles of PSD lattice on PSD formation and its plastic change
PSD晶格对PSD形成及其塑性变化的作用
基本信息
- 批准号:22K06428
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
申請者らが確立した精製法によって得られたPSD lattice (以下 PSDL)を用いて、 PSDの構造可塑性のメカニズム解明を目指した。PSDに内在するtubulinが関与して LTP発現に関わっている可能性の検証を進めた。 PSDにおけるtubulinの存在形態は微小管ではないことは申請者らが明らかにしているが、その具体的生理機能は不明のままである。PSDにはLTP発現時に一過性にspine headに侵入する微小管が接触すると想定されている。本計画では、まずこの一時的な PSD-微小管相互作用に PSDL tubulinが関与している可能性の検証を目指した。まず、in vitroでのPSDLと tubulin/microtubule 相互作用系を構築した。 電顕用グリッドに貼った formvar膜にPSDLを固定し、 tubulin重合中の液滴と接触させて、経時的にサンプルを固定し、ネガティブ染色後、観察を行った。その結果、PSDLが 形成されつつある微小管と接触している詳細な電顕画像が得られた。また、精製 tubulin標品中に PSDL様の構造が生じていること、それが微小管と PSDLと類似の相互作用を行っていることが明らかになった。このことは、外部 tubulinとの相互作用において PSDL内 tubulinが中心的な役割を担っていること示唆するものである。さらに、PSDとtubulin との相互作用についても解析を行い、 PSDL同様の対tubulin相互作用を行っていることが明らかになった。以上の結果は、tubulinが主体となって形成される特殊骨格PSDLが PSDの構造基盤となっているという申請者らの主張と矛盾しないことが明らかになった。
Applicants ら が establish し た refining process に よ っ て have ら れ た PSD lattice (" を PSDL) with い て, PSD の structural plasticity の メ カ ニ ズ ム interpret を refers し た. PSD に inner す る tubulin が masato and し て LTP 発 now に masato わ っ て い る possibility の 検 card を into め た. PSD に お け る tubulin の は existence form of tiny tube で は な い こ と は applicants ら が Ming ら か に し て い る が, そ の specific physiology は unknown の ま ま で あ る. Now PSD に は LTP 発 に transient に spine head に intrusion す る tiny tube が contact す る と scenarios さ れ て い る. This project で は, ま ず こ の transient な PSD - tiny tube interaction に PSDL tubulin が masato and し て い る possibility の 検 card を refers し た. Youdaoplaceholder0, in vitroで <s:1> PSDLと tubulin/microtubule interaction system を construct た. Electricity 顕 use グ リ ッ ド に stick っ た formvar membrane に PSDL を の droplet と contacts in the fixed し, tubulin overlap さ せ て and 経 に サ ン プ ル を fixed し, ネ ガ テ ィ ブ after dyeing and examines 観 を line っ た. そ の results, PSDL が form さ れ つ つ あ る tiny tube と contact し て い る な electric 顕 detailed portrait が must ら れ た. ま た, refined tubulin standard of に PSDL others born の tectonic が じ て い る こ と, そ れ が tiny tube と PSDL と similar の interaction line を っ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の こ と は, external tubulin と の interaction に お い て in PSDL tubulin が な battle in the center of the cut を bear っ て い る こ と in stopping す る も の で あ る. さ ら に, PSD と tubulin と の interaction に つ い て も parsing を い, PSDL with others の tubulin seaborne interaction line を っ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. の above results は, tubulin が subject と な っ て form さ れ る special bone PSDL が PSD の structure substrate と な っ て い る と い う applicants ら の advocated と contradiction し な い こ と が Ming ら か に な っ た.
项目成果
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