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セロトニン2A型受容体のラット小脳特異的サブタイプのクローニング

大鼠小脑特异性血清素 2A 型受体亚型的克隆

基本信息

批准号：
11780573
负责人：
成田正明
金额：
$ 1.41万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780573/
关键词：
セロトニンセロトニン受容体セロトニン2A型受容体小脳

项目摘要

本研究の目的はラットにおけるセロトニン(5-HT)2A型受容体(5-HT2AR)の小脳型サブタイプのクローニングである。研究代表者は本格的なクローニング作業に入る前にまずラット小脳において5-HT2ARのmRNAが発現しているかどうかをNorthern Blotting法によって調べたところ、小脳においても大脳とほぼ同様のサイズに転写産物を認めた。さらにラット小脳RNAで既知のラット大脳型5-HT2ARの塩基配列より作製したプライマーを用いてRT-PCRを行ったところ予想されたサイズにPCR産物を検出できた。研究代表者はラット小脳cDNAを鋳型としてラット大脳型5-HT2ARの塩基配列より作製したプライマーを用いて3'及び5'-RACE法によりラット5-HT2ARの小脳型サブタイプの遺伝子を増幅し、dideoxy法により塩基配列の決定を開始したところ、小脳における5-HT2ARの塩基配列は大脳型のそれと100%の相同性を呈していた。放射性同位体標識5-HT2ARリガンドを用いた脳内マッピングなどの従来の形態学的手法を用いたこれまでの報告では、中枢神経系における5-HT2ARの分布は大脳皮質の神経細胞に限られ、小脳には全く見出されないとされていたが、今回の研究で小脳にも大脳と同じ5-HT2ARが存在することが確かめられた。しかしながら小脳に特異的な2A受容体サブタイプの存在の可能性は低いと考えられる。今後は小脳に存在する2A受容体がどのような機能を担っているのか解明していく予定である。この内容は第29回Society for Neuroscienceで発表した。研究代表者は小脳5-HT2AR遺伝子クローニングの過程で5-HT2AR遺伝子に存在するポリモルフィズム(多型)も発見、拒食症や突然死の解明のきっかけとなった。

The purpose of this study is to investigate the micro-structure of 5-HT receptor 2A. A representative of the study identified the mRNA expression of 5-HT2AR by Northern Blotting method prior to the start of the study. The gene sequence of 5-HT2AR was determined by PCR. The study representatives showed 100% identity between the nucleotide alignment of 5-HT2AR and that of 5-HT2AR in small and large cDNA types using the 3'and 5'-RACE methods. The distribution of 5-HT2AR in the central nervous system was limited to neurons in the cortex, and the presence of 5-HT2AR in the cortex was confirmed. The probability of existence of the receptor is low. In the future, there will be 2A receptors, which will be responsible for the functions of the receptors. The 29th chapter of the Society for Neuroscience was published. The study representatives discussed the development of 5-HT2AR gene mutation, the existence of 5-HT2AR gene mutation, the development of polytype, antifeedant and sudden death.